3.MATERYAL ve METOT

Selçuk Üniversitesi Tıp Fakültesi Anatomi Anabilim Dalında mevcut olan embriyo ve fetüs piyesleri arasından gebelik yaşları 6 ila 24 hafta arasında olduğu tahmin edilen 51 tanesi seçildi. CRL ölçümleri yapılarak tahmini gebelik haftası yaşları tespit edildi. Fetüslerin cinsiyetleri tespit edildikten sonra abdominal bölgeden insizyon yapılarak karın bölgesi açıldı. Gonadların karın içinde yerleşimleri gözlem suretiyle tespit edildi. Gonadlar Anatomi Anabilim dalında bulunan eksizyon materyalleri kullanılmak suretiyle eksize edildi. Alınan materyaller uzun süreden beri aynı formaldehid sıvısı içinde bulundukları için temizlenmeleri amacıyla temiz akar suda 36 saat yıkandıktan sonra tekrar temiz %10'luk formaldehid solüsyonu içine konuldular. Her gün formaldehid solüsyonu değiştirilmek suretiyle 1 hafta süreyle temiz %10'luk formaldehid solüsyonunda temizlenme sağlandı. 1 hafta sonunda materyaller 24 saat akar su altında bırakılarak formaldehid solüsyonundan arıtılmaları sağlandı. Tespit sonrasında, elde edilen materyaller % 70'den saf alkole doğru, konsantrasyon giderek artırılmak suretiyle, alkol serilerinden geçirilerek sudan arınmaları sağlandı. Daha sonra xylenede şeffaflandırma yapıldı. Bir gece sedir yağında bırakılmak suretiyle şeffalandırmanın artması sağlandı. Sonrasında iki kez xyleneden geçirilip temizlenen materyaller xylene ve yumuşak parafin karışımında 1 saat bekletildikten sonra önce erimiş yumuşak parafin ve daha sonrada erimiş sert parafinlerde 2'şer saat bekletilerek son basamakta sert parafine gömüldüler. Parafin blokların herbirinden mikrotom ile 6'şar adet 5m kalınlığında kesitler alındı. Her lamda en az 3 kesit serisi olmasına dikkat edildi. Materyal bloklarından alınan kesitler etüvde parafinlerinin tamamen erimeleri sağlandıktan sonra Hematoksilin-Eosin boyası ile boyandı. Boyama sonrasında materyaller Entellan ile kapatıldı. Çalışma öncesinde embriyo ve fetüsler tüm gövde olarak %10'luk formaldehid solüsyonunda bırakıldığı için testis ve ovariumların geç tespit olması veya iyi tespit olamamasına bağlı olarak 13 adet blokdan alınan kesitlerin ilgili gonadal yapıları sağlıklı değerlendirecek şekilde histolojik özellikler taşımaması nedeniyle çalışmadan çıkarılmalarına karar verildi. Toplam 38 adet materyal ile çalışmaya devam edildi. Bu materyallerin 12 tanesi dişi ve 26 tanesi erkek gonadına aitti. Dişi gonadlarına ait olan materyallerin gebelik haftalarının en düşük 14 haftalık ve en yüksek 23 haftalık oldukları ve bunun yanında erkek gonadlarına ait olan materyallerin gebelik haftalarının ise en az 13 haftalık ve en yüksek 23 haftalık oldukları tespit edildi.. Boyanmış preparatlar Olympus CH2 ışık mikroskobu ile x10, x20, x40 ve x100 objektif büyütmelerinde değerlendirildi. Çalışmada kullanılan gonadların cinsiyetleri, haftaları ve materyal sayıları Tablo:3.1'de verilmiştir.