MODULO V UNIDAD 3 CAPITULO 2
CAPITULO 2
LINEAS CELULARES ESTABLECIDAS.
Las líneas primarias se pueden repicar, preferiblemente antes de llegar
a la inhibición por contacto. Sin regla especial, en alguna ocasión
se observa que ya no sufren más la transición hacia la inhibición
por contacto. Ya no se trata más de una línea primaria, sino de una
línea establecida, que no se inhibe nunca más, viviendo sin pausa
mientras tenga nutrientes y creciendo en varias capas. La pérdida
de la propiedad de la inhibición por contacto significa que el material
cultivado ha dejado de ser una línea primaria para pasar a denominarse
línea celular establecida. Tambien ha ganado la capacidad de perpetuarse
sin morir, pese a provenir de un ser viviente perecedero. Comparte
esa propiedad con los tejidos cancerosos, nerviosos y asociados con
las glándulas sexuales y la placenta.
Se interpreta que una línea establecida es cancerosa. Por ejemplo
la línea Hela viene sujetandose a repicaciones desde hace cincuenta
años sin morir.(???) Se calcula que las células se duplican cada 17,5
horas, cifras asociadas con cultivos de rápida duplicación. Cuando
se les agota el sustrato, entran en una fase estacionaria denominada
ideofase, donde su metabolismo se reduce mucho ("metabolismo basal").
Si se descarta tanto el retardo inicial, como la ideofase final, nos
queda la conducta típica intermedia, asociada con presencia de nutrientes,
denominada trofofase o de crecimiento exponencial. . Para una siembra
de No células por metro cúbico, va aumentando momento a momento
(creciendo el tiempo t) el número N de células por metro cúbico, segun
la ley
(N/No) = 2 (mu..t)
donde mu es la misma tasa de duplicación específica ya estudiada.
Si la duplicación ocurre en 17,5 horas, la tasa mu vale
mu = (ln 2) / 17,5 =
Las bacterias y las levaduras duplican entre los 20 y los 120 minutos,
las algas duplican entre las 2 y las 48 horas, los cultivos establecidos
rápidos duplican cada 15 o 20 horas, el pasto y la alfalfa lo hace
cada 1 o 2 semanas, las gallinas cada 2 a 4 semanas, los porcinos
cada 4 a 6 semanas, los bovinos cada 4 a 8 semanas.
La fórmula de Klein y Revesz para tejidos de tumores de ratón señala
que
N0,333 = No0,333 + b.t
ley que predice (para valores de b altos) que el valor de N o sea
del número de células por metro cúbico, va disminuyendo con el tiempo
(crecimiento frenado por toxinas producidas por el propio cultivo).
CULTIVOS DE TEJIDOS VEGETALES DE INTERES
Diversos investigadores informan para cultivos de tejidos vegetales,
los siguientes valores de mu:
tipo mu
Cultivos de tejidos de frutilla, en suspensión, mu = 0,10 día-1
Cinchona ledgeriana mu = 0,11-0,16 día-1
Nicotiana tabacum, mu = 0,28 día-1
Catharantus roseus mu = 0,35-0,68 día-1
En el caso de la frutilla, el desarrollo de estas técnicas lleva a
que resulten disponibles sabores, pigmentos y aceites esenciales de
esa baya. Para que se desarrollen los pigmentos, los cultivos necesitan
de luz solar, ya que a la sombra no aparecen. La luz, sin embargo,
frena a la producción de biomasa, que es más veloz a la sombra. Con
0 horas a la luz por día, los cultivos de célula de frutilla logran
en 4 semanas que (N/No) valga 2,4, mientras que con 16 horas
diarias a la luz, en 4 semanas (N/No) vale 1,7. (Journal
of Food Science, 54, No 2, 1989, p. 388)
CULTIVOS DE CELULAS Y TEJIDOS VEGETALES
Se describen a continuación diversas formas de llevar a cabo cultivos
de tejidos de origen vegetal, para facilitar los estudios de las propiedades
de cada tipo de tejido.
CULTIVO DE CALLOS. La técnica logra que un cierto agrupamiiento no
organizado de células, denominado callo, crezca en la superficie de
un medio de cultivo sólido. Las fuentes de los tejidos incluyen generalmente
partes vegetativas embrionarias y de las semillas, a veces partes
maduras o tambien tejidos reproductores como los óvulos.
CULTIVO SUSPENDIDO DE CELULAS. Las células vegetales y los agregados
de células, generalmente originados en el cultivo de un callo, se
duplican en un medio líquido de crecimiento, en un recipiente agitado
para suministrar oxígeno disuelto y para romper el agrupamiento de
células.
CULTIVO DE ORGANOS. Los órganos vegetales, tales como las raíces,
los brotes, los embriones, las anteras, los ovarios y los óvulos,
se duplican en un medio sólido de crecimiento o sobre una superficie
sólida conectada por medio de una mecha a un recipiente conteniendo
un medio líquido de crecimiento. La mecha trabaja por capilaridad,
enviando nutrientes a la superficie sólida.
CULTIVO MERISTEMATICO. Se colocan partes o puntas de meristermas,
o sea puntas de brotes, en un medio sólido de crecimiento. Se pueden
así generar plantas individuales (alejadas de riesgos naturales) o
un elevado número de brotes, cuyo cultivo se continúa luego en medios
de arraigo.
CULTIVO DE PROTOPLASTOS. Los protoplastos son células sin paredes,
pero con la membrana plasmática celular que encierra al núcleo y al
citoplasma. Se las aísla a partir de los tejidos mesofílicos de la
hoja, el tejido de la raíz o el cultivo suspendido de las células.
Ellos se cultivan en un medio líquido, permitiendo con ello primero
la manipulación de los protoplastos desnudos y luego la regeneración
de la pared celular antes inhibida. Ya modificados, se los transfiere
a un medio de crecimiento sólido para obtener el crecimiento del callo
y la regeneración de la planta.
Para los ensayos científicos de cultivos de células y tejidos, los
medios sólidos se suelen adquirir de laboratorios de biotecnología
especializados. En general estas técnicas aceleran el período de evolución
de las plántulas, evitan las enfermedades y controlan las mutaciones. Como
todas las plantas son clones, se garante uniformidad en cultivos industriales,
bosques, etc. A veces se buscan plantas mutantes con una serie de
cualidades deseables, para lo cual el espacio necesario es reducido.
Un solo frasco con suspensión de células de trigo alberga unos 40
millones de plantas, o sea 3,2 hectáreas a campo abierto. Con 35.000
frascos, que se pueden hacer atravesar fronteras sin temor a la propagación
de pestes, se dispone deIN enormes estancias en un solo cuarto.
CAMBIOS OBSERVADOS EN TEJIDOS IN VITRO
Mientras que en el organismo se observan diferencias metabólicas y
morfológicas entre los distintos tejidos, esas diferencias tienden
a desaparecer en los cultivos de tejidos. En primer lugar, hay diferencias
entre células del reino vegetal y células del reino animal. Ya en
el reino animal, se observan tambien características diferentes entre
1) tejido epitelial, 2) conectivo, 3) muscular, 4) nervioso embrionario
y 5) sengre y linfa. En la figu 2 aparecen ejemplos de los cinco tipos
de cultivos de vertebrados mencionados.
Previo
Siguiente
>actualización 1998 - 2001
