Os ratos atingem a puberdade entre os 50 e 60 dias de vida, sendo que a abertura vaginal ocorre entre os 35 e 90 dias de idade e o descêncio testicular ocorre entre 20 e 50 dias de idade. Se mantidos juntos desde muito jovens, machos e fêmeas copulam no início da puberdade.
Apesar de poderem copular desde o início da puberdade, aconselha-se a cruzá-los pela primeira vez quando estão entre os 65 e 100 dias de idade, quando as fêmeas deverão estar com aproximadamente 250 gramas e os machos 300 gramas de massa corporal. A idade para o primeiro acasalamento depende da linhagem e do desenvolvimento dos animais.
O ciclo estral dura entre 4 e 5 dias, e o cio dura aproximadamente 12 horas, ocorrendo sempre durante a noite. A ovulação induzida pode ocorrer eventualmente.
Durante o proestro, células epiteliais, algumas células cornificadas e leucócitos estão presentes no esfregação vaginal. O número de células cornificadas aumenta no cio. A quantidade de leucócitos aumenta e o número de células cornificadas diminui ao final do metaestro e no início do diestro. Os ratos são poliéstricos com pequenas variações sazonais. O cio pós-parto está presente em até 48 horas após o parto.
Após a cópula, um tampão vaginal pode ser encontrado por 12 a 24 horas. Vestígios do tampão vaginal podem ser encontrados na cama após este período. Ele se desloca mais facilmente nos ratos que nos camundongos. Colocando-se um papel preto no assoalho de animais recentemente acasalados pode facilitar a localização do tampão vaginal e controle dos dados da reprodução.
Espermatozóides estão presentes no esfregaço de lavado vaginal caso a cópula tenha ocorrido. Aos 14 dias de gestação o desenvolvimento mamário é bem evidente. O período de gestação é de 21 a 23 dias, desde que não haja gravidez concomitante com a lactação, o que prolongaria a gestação por mais alguns dias. A exposição de um macho às fêmeas gestantes não impedirá a nidação (implantação do embrião à parede do útero) e não causará o efeito Bruce (interrupção da gravidez). A pseudogestação é rara, mas quando ocorre dura cerca de 13 dias.
Seus ninhos são fundos e não muito largos. Algodão, maravalha e papel são bons materiais para construção de ninhos. Sabugo de milho picado pode fazer com que os filhotes sejam expostos ao fundo da caixa o que pode levar a uma hipotermia (baixa temperatura corporal) e abandono dos filhotes pela mãe.
Algumas horas antes do parto, a fêmea limpa a região perineal e ums substância mucosa e clara flui da vagina. Nascem de 6 a 12 filhotes. Aos 7 dias de idade os pêlos são evidentes e os olhos se abrem. A destruição da ninhada ou o abandono pela fêmea pode ocorrer nos primeiros dias de vida devido a fatores estressantes, ao manuseio excessivo, e outros fatores abordados para os hamsters em outro tópico.
Aos 12 dias de idade, quando os filhotes já possuem entre 40 e 50 gramas de massa corporal, já podem ser desmamados. Se o cio pós-parto não foi utilizado, a fêmea retomará o ciclo estral de 2 a 4 dias após o desmame.
