����ԹԨ��·ҧ��ͧ��Ժѵԡ��

��÷��ͺ�������Тͧ������ʹᴧ��Դ��ʹ����

(One Tube Osmotic Fragility Test:)

��ѡ���
������ʹᴧ�������������㹹�����ͤ�������������� 0.85 (0.85% NaCI) �Ф���Ҿ���� (biconcave) ����� ���ͧ�ҡ����������� ��ҡѺ�����¹͡���� ����Ŵ��������鹢ͧ�������ŧ��ӹ͡������ҡ��������� ��Ө����������� ����Ф��� � ��������������Ŵ��������鹢ͧ���ͨ��֧�дѺ˹�� ��ӨЫ��������쨹������ʹᴧᵡ ������ʹᴧ��ᵡ���� (increased osmotic fragility) ����ᵡ�ҡ (decreased osmotic fragility) �������Ѻ�ѵ����ǹ�ͧ��鹷�輹ѧ�����ͤ�������鹢ͧ���������������ǹ�˭��� �����źԹ �������㴡����������������ʹᴧ���ѵ����ǹ�ѧ������������ ������ʹᴧ���ᵡ�ҡ �� target cell, hypochromic cell �ç�����Ѻ spherocyte ���ᵡ���� ���ͧ�ҡ���ѵ����ǹ�ѧ�����Ŵŧ �ҡ����֡�Ңͧ Kattamis C. ��Ф�о���Ҥ�������鹢ͧ������ͷ�������� 0.36 ������ʹᴧ�ͧ�����Ԩ�ᵡ��� ��������ʹᴧ�����¸���ʫ�������м����·���繾��Ш��ѧᵡ������ �֧�����ҹ������������ 0.36 �������㹡�õ�Ǩ��ͧ�����ԹԨ��¸���ʫ����� ��੾�����ҧ��觨��ջ���ª��㹡�����Ǩ�Ҽ�����繾������ͤǺ�����л�ͧ�ѹ�ä����ʫ����� ���ҧ�á�����÷��ͺ������������Ш��ѡ ����������蹷��������ʹᴧ�� hypochromia ������������ǡѹ �� ��ä���Ե�ҧ����Դ�ҡ��âҴ���� �繵�

�����������

Buffer saline solution

• Stock solution : 10% NaCl buffer solution
  1. NaCl 90.00 ����
  2. Na2 HPO4 13.65 ����
  3. NaH2PO4.2H2O .43 ����
  4. �����ӡ������ú 1000 ��.

• 1 % Buffer saline solution
  1. Stock solution 50 ��.
  2. �����ӡ������ú 500 ��.

• Working buffer saline solution (0.36% NaCl)
  1. 1% Buffer saline solution 180 ��.
  2. �����ӡ������ú 500 ��.

�Ըա��

1. ��� working buffer saline 5 ��. ���ʹ���ͧ��Ҵ 13x100 ��.
2. ��໵���ʹ 20 �����Ե� �����ʹ���ͧ㹢�� 1 ������ʹ�Ѻ������¡�á�Ѻ��ʹ��� �� � ��駷��������س�������ͧ 15 �ҷ� ��ҹ�ŵ�����

�����§ҹ��

Nagative : ���������� �ʴ����������ʹᴧᵡ��� (91-100% hemolysis)

Suspicious : �������¢����硹����ʴ�����պҧ��ǹ�ͧ������ʹᴧ���ᵡ (86-90% hemolysis)

Positive : �������¢�� �ʴ������ǹ�˭�ͧ������ʹᴧ���ᵡ (���¡��� 85% hemolysis)

�͡�����ҧ�ԧ

��÷��ͺ�ҧ��ͧ��Ժѵԡ�� ���ǡѺ�����Դ���Ԣͧ������ʹᴧ �Ѱ�� �����. ��Ź�� �����ԭ ��óҸԡ�� �Ҥ�ԪҨ�ŷ��ȹ��Թԡ ���෤�Ԥ���ᾷ�� �����Է����¢͹��. 2540: 16-19.

������� �Թ��٪ѹ �ʹ���

(Inclusion bodies staining)

��ѡ���
�����źԹ�ͪ �������źԹ�������ʶ��� ����Ͷ١�͡��䴫������ briilliant cresyl blue ���� methylene blue �е��С͹ ���������չ���Թ������١�Ѵ�����������

�����������

Citrate saline solution:

1. 3% Sodium citrate solution
2. 0.9% NaCl 80 ��.

2% brilliant cresyl blue

1. Brilliant cresyl blue 2 ����
2. ��� citrate saline solution ���ú 100 ��.

�Ըա��

1. ��໵���ʹ 500 �����Ե��������÷�ǻ좹Ҵ 1.5 ��. ��任�� 5 �ҷ� ��� 3,000 �ͺ/�ҷ� �ٴ���੾��������ʹᴧ��ǹ���� buffy coat �� 1 ��ǹ ����Ѻ �� 2% brilliant cresyl blue 1 ��ǹ ���ʹ���ͧ��Ҵ��� (10x75 ��.)
2. ��蹷�� 37�. 2 �������
3. ����ͤú 2 ������� ����ǹ����ͧ���ʹ������ҷ�����������ʹ������������

�����§ҹ��
�Ѻ������ʹᴧ����� �Թ��٪ѹ�ʹ��� ��ͨӹǹ������ʹᴧ 50,000 ���� ������§ҹ�� % �Թ��٪ѹ �ʹ���

�����˵�

1. �������ä �����źԹ�ͪ (alpha-thal 1/alpha -thal 2 ���� alpha-thal 1/Hb CS) �о��Թ��٪ѹ�ʹ��� �ҡ��ͺ 100% ¡��鹶�Ҽ����������ТҴ������������ % �Թ��ٺʹ��� ��Ŵŧ
2. �������ä �����źԹ���պ����� (alpha-thal 1/alpha-thal 2-HbE) ���Թ��٪ѹ�ʹ��� ����ҳ������ 5-6
3. ��ſ��ٹ��-����ʫ������õ ���Թ��٪ѹ�ʹ��� �� 1 � 100,000

��÷��ͺ�����źԹ �� �¡�õ��С͹���� �ի��;�
�

Dichlorophenol indophenol (DCIP) Precipitation Test

��ѡ���
�����źԹ�� �������źԹ�Դ���� ����Դ�ҡ�ô����⹵��˹觷�� 26 ���µҺյ�-�źԹ ����¹�ҡ�ô��ٵ��ԡ (Glu) ��� �ūչ (Lys) (Hb E : glu- -> lys) �����ռŷ����ѹ�з���ִ�����ҧ�����ſ�-�źԹ�Ѻ�յ�-�źԹ�˹�����蹹���ŧ�����źԹ����è�������ٻ�ͧ൵������� (tetramer) �֧��ش�͡�ҡ�ѹ������ٻ�ͧ���������´ի��;� ���������źԹ���������ٻ�������� ���С͹ŧ�� �����źԹ�������ʶ������ � (unstable Hb) �� �����źԹ�ͪ �����źԹ������ ������ö�١�͡��䴫���鵡�С͹������մի��;�

�����������

DCIP reagent

1. Trisma base 4.36 ����
2. EDTA Na2.2H2O 2.68 ����
3. DCIP 0.0276 ����
4. Saponin 0.05 ����
5. ��Ѻ ���ͪ ����� 7.5 ���� 6N HCI
6. �����ӡ������ú 500 ��.

�Ըա��

1. �����ʹ������մշ��� (EDTA) ����áѹ���ʹ���һ�蹷�� 1000 g �ҹ 10 �ҷ� �����¡��� ��ǹ����繾����ҷ���
2. ��������ʹᴧ�ҡ��� 1 �� 20 �����Ե� ���ŧ���ʹ���ͧ����� DCP reagent 5 ��. ������ʹ�Ѻ����� �¡�á�Ѻ��ʹ���ͧ����� � ���ǹ����蹷�� 37 �. �ҹ 1 �������

�����§ҹ��

Negative : ����������

Positive : �������¢��

�����˵�
�����蹹���ҡѺ���ʹ��� 37 �. �ҹ�ҡ���� 1 ������� �����źǡ������

 /Home/Thalassemia/Laboratory/Treatment/PND/Questions/Conference/Thal. club/Links/

Hosted by www.Geocities.ws