objetivo del proyecto

Nuestro proyecto esta centrado en el uso de bacterias para la desalinización del agua, por lo cual   hemos planteado la hipótesis de que las bacterias halófilas (que resisten ambientes hipersalinos) podrían Metabolizar la sal o realizar algún tipo de Osmosis Inversa,  Producir a través de la utilización de presión un movimiento de agua en contra del gradiente de concentración.

estado actual del proyecto  (actualizado 28 de noviembre 2004)

Materiales:

·        4 botellas esteriles y 4 envases estériles

·        Alcohol 97% y Guantes de látex esteriles

·        Medidor salinidad y Medidor ph. o también Papel para medir ph

·        Termómetro

·        Marcador permanente,  Regla,  Cámara fotográfica, Mesa plegable (en su efecto alguna superficie de trabajo)

·        Microscopio con un Espejo (para hacer funcionar microscopio con luz solar)

·        Portaobjeto,   Cubreobjeto, Solución de azul de metileno y    Aceite de inmersión  (para tinción simple)

·        Incubadora

·        Agua destilada

·        Vaso precipitado

Para los medidores es necesario ajustar sus medidas después de cada vez que se usen, en el caso del medidor de ph se debe introducir en una solución de agua destilada hasta que este marque un ph 7. en el medidor de salinidad se debe introducir en una solución de agua con sal hasta que marque .30. cabe destacar que estas medidas depende con el equipo que se trabaje, cuyo procedimiento debería salir con las indicaciones de uso.

salintest             pHimetro

 Procedimiento

1.     Ubicar piscinas con poca densidad de algas para poder tomar las muestras más “puras”.describir piscina y sacar fotografía.

2.     Usar guantes y esterilizarlos con alcohol. Sacar muestra con botella estéril (que después ira a laboratorio).

3.     Sacar muestra con envase estéril (para su análisis en laboratorio del colegio).

4.     Rotular envase con nombre de la piscina de donde se extrajo la muestra.

5.     Medir temperatura, ph y salinidad. Con los instrumentos descritos, en el caso del ph corroborar la medida del aparato con papel medidor ph.

6.     Sacar muestra para analizar en microscopio en terreno.

7.     Mantener todas las muestras en incubadora con temperatura del medio, de donde se extrajo la muestra

*todo lo anterior se repite 4 veces (con las 4 botellas y envases), eligiendo distintas piscinas de desalinización, para poder realizar diferentes análisis*

8.     Una vez en santiago cultivar muestras en medio de cultivo para bacterias halofilas (con sales en distintas proporciones), ajustando pH, y temperatura.

Medio de cultivo

 De las muestras tomadas en Cáhuil, se cultivó en un medio especial para bacterias Halófilas moderadas.

Medio:

• Extracto de levadura .......     5 g

• Glucosa ............................    1 g

• Proteosa peptona  .............   5 g

• NaCl  ................................    30 g

• FeCl₃ ................................    9 gotas

• MgCl₂ x 6H2O .................     42 g

• MgSO₄ x 7H2O.................    60 g

• CaCl₂ x 2H20…………….     1.1 g

• KCl....................................     6  g

• NaCO₃H.............................   0.2 g

• NaBr...................................    0.7 g

Agregar agua destilada hasta llegar a un volumen de 1000 ml (1 L)

Agar agar al 2% ; PH 7,4

Esterilizar en autoclave a 121ºC por 15 minutos a 1 atm de presión

Análisis de resultados

 De las muestras incubadas a 37º C, se pudo observar el crecimiento de variadas colonias, que luego fueron clasificadas y estudiadas a fondo independientemente, haciendo ceparios de cada una.

 ir al procedimiento de como se hizo cepario

·    Pruebas de Identificación: Se hicieron variadas pruebas para comprobar que las colonias observadas pertenecían a bacterias Halófilas, entre las cuales se encuentran:

• variaciones de salinidad,  se sometieron a las bacterias a cultivos con diferentes concentraciones de salinidad, entre un 5% de sal hasta un 20% de sal. clic en el enlace para ver la tabla de resultados     ir a tabla

• Tinciones, simple y gram.    ir a tinciones

• Pruebas Bioquímicas,de las cuales tenemos positivo los test: MIO, CAT y oxidasa positivo  

se les sometió a distintas situaciones que las involucraban con la afirmación de la hipótesis propuesta en un comienzo (Desalinización de Agua).

Conclusiones

1. Descubrimos que existen lugares en Chile donde habitan Bacterias Halófilas Moderadas y Extremas (salinas de Cahuil).

2. Además, confirmamos que estas bacterias incorporan NaCl en su citoplasma para evitar su deshidratación, debida al medio hipersalino donde habita

Proyecciones

·   Lograr la desalinización o a lo menos disminución de la salinidad del agua de mar a través de bacterias halófilas, lo cual de una u otra manera podría abaratar costos de este proceso. 

·   Lámpara de sal, con bacterias halófilas, que al tener en el interior de su citoplasma una alta concentración de sal para evitar la deshidratación, es capaz de transmitir la electricidad.