Tinciones

Se hicieron tinciones a las muestras que resistieron la concentración de sal al 3% y 5%

La placa es la ultima fresca con la cual se trabajo, el numero de colonia es la que estamos trabajando, pues todavía no la identificamos solo sabemos que son resistentes a las concentraciones de sal. se tiño con cristal violeta durante 30 segundos

                                                                           P4/M2 3%            P4/M2 5%

1            bacilos                    bacilos

2            bacilos                    bacilos

3            bacilos                    bacilos

4            bacilos                    bacilos

5            no creció                no creció

6            bacilos                    bacilos

7            cocos                     cocos

Tinción Gram

1. la tinción Gram se hizo con el siguiente protocolo:

2. se fijo la muestra

3. se aplico cristal violeta 30 seg.

4. se lava

5. se aplico yodo Gram 30 seg.

6. se lava

7. se aplico alcohol 5 seg.

8. se lava

9. se aplico safranina 30 seg.

10. se lava

11. se lleva a microscopio con el mayor aumento (1000x) con una gota de aceite de inmersión

                                                        colonia                   color de tinción

1            rosadas                    rosadas

2            rosadas                    rosadas

3            rosadas                    rosadas

4             rosadas                    rosadas

5            no creció                   no creció

6              rosadas                    rosadas

7             azules                    azules

Esta tinción emplea dos colorantes básicos, el cristal violeta, usado como colorante primario, y posteriormente Ia safranina empleado como colorante secundario . Las bacterias Gram (+) se tiñen de color azul oscuro a violeta por Ia incorporación estable del colorante primario. En cambio, las bacterias Gram (-), las cuales pierden durante el proceso de tinción el colorante primarlo, se tiñen de color rosado por el empleo de Ia safranina como colorante secundario.

Características de las gram (-)

Estas bacterias se caracterizan por presentar una membrana celular interna la cual se rodea por una pared celular delgada de peptidoglicano y, hacia el lado externo del cuerpo celular una membrana celular externa que recubre la pared celular en estas bacterias. Entre la membrana citoplasmática interna y la membrana externa está el espacio periplásmico el cual presenta una sustancia llamada periplasma la cual contiene enzimas importantes para la nutrición en estas bacterias.

La membrana externa presenta una estructura llamada lipopolisacárido (LPS) y tiene diversas proteínas, siendo una de ellas las proteínas llamadas porinas o canales proteícos. El LPS está formado por tres regiones: el polisacárido O (antígeno O), una estructura polisacárida central (KDO) y el lípido A (endotoxina).