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Equipe de Construção

Construtores: Cristiano Martins Quintão

                       Mateus Maciel e Sousa

                       Roberto Rômulo de Medeiros Souza

 

          A Espectrofotometria pode ser conceituada como um procedimento analítico através do qual se determina a concentração de substâncias mediante a absorção de energia radiante (luz).

          A luz é constituída por partículas denominadas de fótons ou quanta que se locomove como uma onda, caracterizada pelos diversos comprimentos (l, expressos em mm ou nm). A luz visível tem as mesmas características físicas que outras ondas eletromagnéticas como: ondas de rádio, televisão, infravermelho, raios- X e gama. 

          No espectrofotômetro a luz é conduzida através de um monocromador (prisma ou grade de difração), para separar os comprimentos de luz resultando em faixas de cores individuais. A luz de um comprimento de onda é dirigida contra um tubo (cubeta) com uma solução do material a ser examinado (amostra). A quantidade de luz capacitada a passar através da solução é medida por um fotômetro (foto-célula e galvanômetro), como absorbância (densidade ótica) ou transmitância em porcentagem

Figura 01.Esquema óptico de um espectrofotômetro com detector de arranjo de diodos

A Lei de Lambert-Beer:

           Quando um feixe de radiação monocromática incide sobre uma solução homogênea, uma parte desta radiação é absorvida. A intensidade de radiação absorvida (A) depende do caminho óptico que a luz percorre dentro da solução (b), da concentração da espécie em solução (c) e da constante de absortividade molar (constante de proporcionalidade que relaciona a absorbância com o caminho óptico e a concentração) desta espécie (k). Isto é descrito pela Lei de Lambert-Beer.

A= kbc

 

            Portanto, mantendo-se o caminho óptico constante, pode-se determinar a concentração de uma espécie em solução, através da medida de absorbância. Na prática, uma curva de calibração, absorbância x concentração, da espécie de interesse é construída e a concentração da amostra é determinada através desta curva.

É desta relação que algumas fórmulas são descritas. Nas aulas práticas usaremos a fórmula abaixo:

                          

Cd= concentração desconhecida (amostra)

Ad= absorbância do desconhecido

Ap= absorbância do padrão

Cp= concentração do padrão

Obs.: esta fórmula aplica-se apenas quando a lei de Lambert-Beer é seguida, isto é a absorbância e a concentração são diretamente relacionadas. Algumas soluções não mostram essa relação. Neste caso, uma curva padrão deve ser usada para determinar a concentração desconhecida.

É possível organizar uma tabela com as cores de cada um dos intervalos de radiação da faixado visível e as suas respectivas cores complementares.

 

Branco Padrão e Amostra

 

        Na pratica laboratorial utiliza-se normalmente três tubos de ensaio (amostra individual) que são denominados:

a) Branco: solução que contém todas as espécies químicas menos a substância a ser dosada (serve para zerar o aparelho).

b) Padrão: solução contendo uma concentração conhecida da espécie química a ser analisada.

c) Amostra: solução teste.

 

Curva de absorção espectrofotométrica

         Usando água destilada como referência (branco), efetuar as leituras de Absorbância (ou D.O.) do Alaranjado de Metila e do azul de bromofenol nos seguintes comprimentos de onda (400, 420, 440, 460, 480, 500, 520, 550, 600, 650 e 700 nm)

 

Preencher os dados da tabela abaixo (Aula Prática):

                      Utilizando os dados da tabela acima preparar um gráfico (x = comprimento de onda nm) e (y = leitura em absorbância), encontrando qual o comprimento de onde se refere ao pico de absorção do corante usado em aula.

Absorbância

l

Qual o comprimento de onda correspondente ao Pico de absorção da luz?

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