DETERMINACIÓN DE LIPOPROTEÍNAS

Existen múltiples sistemas que permiten su determinación, si bien algunos, por su extremada complejidad son de uso experimental y no clínico.

El método de referencia es el de ultaracentrifugación, que no se emplea como método rutinario.

El método de ultracentrifugación en gradiente de densidades se basa en el hecho de que todas las proteínas plasmáticas tienen una densidad aproximada de 1,350g/ml con excepción de las lipoproteínas que presentan densidades menores y se mantienen en suspensión por la agitación térmica, por su interacción con las  moléculas de agua del entorno y por el flujo sanguíneo.

Si se las somete a una ultracentrifugación de 100.000 g la fuerza centrifuga actúa como si se incrementará muchísimo la fuerza de la gravedad y , todas las proteínas presentes en el suero, excepto las lipoproteínas tenderán a depositarse en el fondo del tubo, mientras que dichas lipoproteínas formarán una capa superficial opalescente.

Si se deposita un volumen de plasma en el fondo de un tubo y sobre él se dispone un gradiente de concentraciones de bromuro potásico (BrK) que ocupa el rango desde 1,210g/ml hasta 1,006 g/ml, cuando se someta al conjunto a una ultracentrifugación a 140.000 g durante 24h, por el principio de Arquímedes, el contenido del plasma se colocará formando bandas estables que se corresponderán con las zonas de su misma densidad. Si existe un colorante de grasas en el medio, se aprecian una serie de bandas que se corresponden con las  diferentes familias de lipoproteínas.

 

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