Su piloto es Shinji Ikari, este Eva fue el Segundo en fabricarce , y se puede decir que es el mas poderoso ya que de todas sus peleas ha salido victorioso. La diferencia de éste EVA con los demas es su diseño; aunque por fuera pueda parecer igual al resto, detalles como placas cubre-pecho son los que muestran que es un EVA distinto. Este EVA tiene dos ojos y sus colores son una mezcla de verde, morado y naranjo. La Unidad 01 fue "despertada" con su máximo poder durante una pelea con el Angel numero 14 entrando en Bersek Mode ya que este Eva tiene en su interior el alma de Yui (la madre de Shinji), tambien posee un Órgano S2 que le permite regeneranse, este Eva fue diseñado para provocar el tercer impacto, recibe el nombre de "Arca de la Vida" por Fuyuksuki.