�Ը��ҵðҹ����Ѻ����������� (Standard Operating Procedure)
Total Phosphorus
���Ը� Persulfate digestion ��� Ascorbic acid
��ʿ����(phosphorus)㹹�Ӹ����ҵ����㹹��������ǹ�˭�������ٻ��ҧ�ѹ�ͧ ��ʿ����(phosphate) �������ö�¡���� ����⸿���� (orthophosphates) �ഹ������ (condensed phosphates,pyro-, meta-,and polyphosphates ����) ��� Organically Bound Phosphates ��������ٻ�ͧ�������� ����ǹ����������ҧ��¢ͧ����ժ��Ե㹹�� Phosphorous�繸ҵط�����㹡����ԭ�Ժⵢͧ�ת����ѵ�� ����ѡ�о������ Growth Limiting Nutrient �ͧ���觹�� �ѧ���㹡�û���¹�����á����� Phosphorous����ŧ����觹�� �Ҩ�С�е������Դ�����ԭ�Ժⵢͧ�ת������ҧ�Ǵ�����ѹ�������Դ�ѭ����� � �����
1. �ͺ���¡�÷��ͺ
�Ըա�÷��ͺ�����Ѻ������ҧ������¨ҡ���������ص��ˡ���
2. ��ҷ����§ҹ��(detection limits)
Minimum Detection Limit ��ҡѺ 0.1 mg P/l
3. ��������´��û�Сѹ�س�Ҿ(quality assurance criteria)
3.1 QA Limit ����Ѻ Spike Recovery ��ҡѺ 20%
3.2 QA Limit ����Ѻ������������� ��ҡѺ 15%
4. ��ѡ���
������������ҿ�ʿ���ʷ����� ���� 2 ��鹵 ���
4.1. ����¹��ʿ������ٻ��ҧ����������ٻ Orthophosphates �������¹���¡���������� �����Ը� Persulfate Digestion
4.2.�Ҥ�� Orthophosphates �������¹�Ӵ����Ը� Ascorbic Acid �� Ammonium Molybdate ��� Potassium Antimonyl Tartrate �зӻ�ԡ����������ǡ�ҧ����繡ô�Ѻ Orthophosphate ������Դ Phosphomolydic Acid ��觨зӻ�ԡ���ҡѺ Ascorbic Acid �� Molybdenum Blue
5. ������ѡ�ҵ�����ҧ
㹡óշ��зӡ���� Total Phosphorus ���ҧ��������ö���ѡ�ҵ�����ҧ�� 3 �Ըդ��
5.1. ������秵�����ҧ������ͧ������� � ����
5.2 ��� �ô HCl �����㹻���ҳ 1 ml ��͵�����ҧ 1 l ��������� ����
5.3 ����ô H2SO4 �����㹻���ҳ 2 ml ��͵�����ҧ 1 l ���������
������������������ҧ���� 28 �ѹ ������ҧ����դ�ҿ�ʿ���ʹ����������㹢Ǵ���ʵԡ�����Ҩ�Դ��ôٴ�Ѻ����ѧ�Ǵ�� �Ҫ�з��Ӵ�����Ƿء��Դ�����㹡���ҿ�ʿ���� ��ͧ��ҧ���¡ô HCl 1:1������ҧ���¹�ӡ������� � ����������鼧�ѡ�͡㹡����ҧ����ͧ���
6. ���ú�ǹ
6.1 Arsenates ����ö�ӻ�ԡ���ҡѺ�������� Molybdate ������Դ�չ���Թ �����ǡѺ Phosphate ��������� 0.1 mg As/l ��ú�ǹ����� Phosphate
6.2 Hexavalent Chromium ��� NO-2 ����������� 1 mg/l ��ú�ǹ����ҷ������� 3% ��з���������� 1.0 - 10 mg/l �з�����ҵ��� 10 -15%
7. ����ͧ�������ػ�ó�
7.1. Spectrophotometer�������ö������������880nm������� ��Ҵ1cm�����˭���ҹ��
7.2. ����ͺ�������(autoclave )
7.3. �Ǵ�Ѵ����ҵ�(volumetric flask)
7.4. �դ����(beakers)
7.5. ����(Pipets)
7.6. ��к͡�ǧ(cylinder)
7.7. �Ǵ��Ǿ�����ҷ������ö���������ͧ Autoclave ��� 120 oC ��Ҵ 100 ml
8. ������
8.1.���������ҵðҹ Phosphate (20 mg P/l)
�� anhydrous KH2PO4 �� 87.8 mg �����㹹�ӡ�������� 1,000 ml (1 ml �ͧ�������·�����������դ����������ҡѺ 0.02 mg P)
8.2. �������� Phenolphthalein Indicator
����� Phenolphthalein 5 g� 500 ml �ͧ 95% Ethyl alcohol ��л�Ѻ����ҵ������ 1,000 ml ���¹�ӡ���
8.3. �������� H2SO4
��� H2SO4 ����� �ӹǹ 300 ml ŧ㹹�ӡ��� 600 ml ���ǻ�Ѻ����ҵ������ 1,000 ml ���¹�ӡ���
8.4. ��� Potassium Persulfate (K2S2O8)
8.5. NaOH 1N
����� NaOH �ӹǹ 40 g㹹�ӡ��� ���ǻ�Ѻ����ҵ��� 1,000 ml ���¹�ӡ���
8.6 H2SO4 5 N
�ӡô H2SO4 ����� �� 70 ml ���㹹�ӡ������ǻ�Ѻ����ҵ������ 500 ml
8.7. �������� Potassium Antimonyl Tartrate
�������� K(SbO) C4H4O7. 1/2 H2O �ӹǹ 1.3715 g 㹹�ӡ��� 400 ml ���������ӡ�������� 500 ml ��㹢Ǵ�ء���
8.8. �������� Ammonium Molybdate
�������� (NH4)6 Mo7O24.4H2O �ӹǹ 20 g ŧ㹹�ӡ��蹻���ҵ� 500 ml ��㹢Ǵ�ء���
8.9. �������� Ascorbic Acid 0.1 M
�������� Ascorbic Acid �ӹǹ 1.76 g 㹹�ӡ��蹻���ҵ� 100 ml �������¹������������ ����س����� 4oC ����ö���� 1 �ѻ����
8.10. �������¼��
����������¢�� 6-9 ����ѵ����ǹ�ѧ���
��� 6 : ��� 7 : ��� 8 : ��� 9
50 : 5 : 15 : 30
�����������¼�� 100 ml
㹡�ü�������������Т�鹵 �¼����â�� 6 ���7 �����ҡѹ�ա����Ǩ֧�����â�� 8 ���������ҡѹ���Ǩ֧�����â�� 9 ��������ҡѹ ��������������س���������س�������ͧ ����ù�������ҹ 4 �������
9. ��鹵�����������
9.1. ��÷� Standard curve
�����������ҵðҹ phosphate (20 mgP/l) �� 0, 1, 2, 3, 4, 5 ml �����ӡ�������� 50 ml �����������¿�ʿ�����ҵðҹ����դ�������� 0, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, ��� 2 mg/l ����ӴѺ ���������������������ҧ�ء��鹵 (�óշ���� Standard Curve �������� �����������������ҵðҹ������ҧ���� 2 ��������� ���ǹ��������������������ҧ�ء��鹵 ��е�Ǩ�ͺ�����١��ͧ �¤�� % Difference ��ͧ���¡��� 15%)
9.2. ��÷� QC
���͡������ҧ���ҧ���� 1 ������ҧ ��͵�����ҧ�ء� 10 ������ҧ ����Ѻ���������������� Spike Recovery ���բ�鹵��������������ҧ(����Ѻ 1 ������ҧ)�ѧ���
9.2.1. �� Volumetric Flask ��Ҵ 50 ml �� 3 �Ǵ
9.2.2. ��� ������ҧ������͡�������Ѻ�ӡ��������������� Spike Recovery �ӹǹ 10 ml ����� Flask
9.2.3. �� 2 Flask �����������ҧ���� ��������������ҵðҹ Phosphate (20 mg P/l) flask �� 1 ml
9.2.4. �����ӡ���㹷�� 3 Flask �������ҵ��������� Flask 50 ml
9.2.5. ����������������ǡѺ������ҧ���
9.3. ����������������ҧ
�������¹��ʿ�������������ٻ�ͧ Orthophosphate ���Ը� Presulfate Digestion
9.3.1. �ӵ�����ҧ�� 50 ml �����¡������������ӡ�������� 50 ml ���㹢Ǵ��Ҵ��è� 100 ml
9.3.2. ����������� Phenolphthalin Indicator 1 �´ ��ҵ�����ҧ����¹����ᴧ��������� ����� H2SO4 ŧ仨���ᴧ����
9.3.3. ����������� H2SO4 �ӹǹ 1 ml
9.3.4. ������ K2S2O8 �ӹǹ 0.5 g �Դ�����ʹԷ
9.3.5. �ӵ�����ҧ��������ͧ Autoclave ����س����� 120 oC ���� 30 �ҷ�
9.3.6. ��������������� Phenolphthalein Indicator 1 �´ ��л�Ѻ pH ���� NaOH 1N ���������ҧ�ժ�����
9.3.7. ���µ�����ҧ���� Volumetric Flask ��Ҵ 100 ml ���ǻ�Ѻ����ҵô��¹�ӡ�������� 100 ml
9.3.8. �ӵ�����ҧ�������������Ը� Ascorbic Acid Method
����Ҥ�� Orthophosphate ���Ը� Ascorbic Acid
9.3.9. �ӵ�����ҧ�� 50 ml ��� phenolphthalein indicator 1 �´ ��ҵ�����ҧ����¹����ᴧ ������ H2SO4 5 N �����´��������
9.3.10. ����������¼�� ����ҳ 8 ml ŧ㹵�����ҧ��Ѻ����ҵ������ 50 ml ���������ҡѹ�� ��ѧ�ҡ��� 10 �ҷ� ������Թ 30 �ҷ� ���ӵ�����ҧ��Ѵ��� absorbance ��� 880 nm
10. ��äӹdz
Total Phosphorous, mg P/l = (��������鹢ͧ��ʿ���ʷ����ҡ Standard curve, mg P/l) x 50
����ҵâͧ������ҧ�����, ml