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Técnicas Parasitologicas

Método de Sedimentación Simple en Copas

FUNDAMENTO

Este procedimiento de decantación en copas es una técnica farmacéutica conocida desde muchos años en el cual se utiliza un procedimiento físico para la separación de mezclas.

Este método también es utilizado para el diagnostico de aquellas muestra de heces fecales sospechosas de contener huevos de Fasciola hepatica; el método ha demostrado ser bondadoso para otro tipo de huevos de helmintos e incluso para quistes de protozoario. Las ventajas que tiene, sobre otro, es que hace una concentración de volúmenes considerablemente grandes de materia fecal.

MATERIAL

·        Verde de malaquita

·        Detergente

·        Agua de la llave ó Agua destilada  

·        Solución de detergente al 5% ( Se pasan 5 g de detergente de cualquier marca y se disuelve en 1000 ml de agua; el detergente que no se alcance a disolver, se sedimenta y decanta el sobrenadante o se deja en el frasco donde se guarda la solución, pues no interfiere en el proceso)

·        Solución de  verde de malaquita al 1% ( Se disuelve el verde de malaquita en los 100 ml de agua y se guarda la solución en frascos con tapón esmerilado).  

·        Copas crónicas

·        Pipeta pasteur

·        Portaobjetos

·        Cubreobjetos.

·        Embudo  

·        Microscopio compuesto  

·        Aplicadores de madera

·        Bulbos de caucho

·        Gasa

METODO

1.   En el recipiente donde se llevo la muestra al laboratorio se homogeneiza la muestra con agua de la llave y se hace pasar a través de la gasa previamente colocada en un embudo y recibiendo la suspensión en la copa.

2.   Se colocan 5 ml de colorante y se agita con un aplicador

3.   Se agregan 5 ml de la solución de detergente y se agita nuevamente

4.   Se completa el volumen de la copa y se deja reposar durante 15 min.

5.   Se decanta el sobrenadante y se agrega mas agua, mezclando con el aplicador y se deja reposar otros 15 min.

6.   Se decanta nuevamente el sobrenadante.

7.   Con la pipeta con bulbo, se toma del sedimento la muestra que se coloca en el  portaobjetos  y se pone el cubreobjetos.

8.   Se observa con el microscopio, usando objetivos de 10X y 40X, cuando sea necesario.

9.   Se hacen tres preparaciones de cada sedimento para asegurar la positividad de la muestra. Cuando se tiene suficiente practica se puede utilizar la lupa del microscopio, sobre todo cundo se busca la F. hepatica.