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Técnicas Parasitologicas

Método de Charles - Barthelemy

FUNDAMENTO  

Bueno no hay mucho que decir pero su utilidad es para hacer una buena concentración de quistes, huevos y larvas.

Pero como todo buen método tiene una limitación que es por resulta antieconómico por los reactivos que utilizan.

MATERIAL

·        Formaldehídos Q.P.

·        Cloruro de sodio

·        Ácido cítrico cristalizado

·        Agua destilada

·        Éter etílico  

·        Solución salina formolada

·        Solución cítrica formulada

·        Lugol  

·        Tubos de ensayé

·        Portaobjetos

·        Cubreobjetos

·        Pipeta Pasteur  

·        Microscopio compuesto

·        Centrifuga  

·        Cápsula de porcelana

·        Tela metálica de malla fina o gasa

·        Tapones de caucho

·        Aplicadores

METODO  

1.   Suspender 1 a 2 g de materia fecal en 10 ml aprox. En la solución salina formulada, utilizando la cápsula de porcelana para homogenizar.

2.   Pasar la suspensión a través de la malla o gasa.

3.   Centrifugar a 1,8000 rpm durante 60”

4.   Decantar y agregar el sedimento de solución cítrica formulada, hasta llenar unos dos tercios de tubos.

5.   Agitar con fuerza y añadir el éter hasta ½ del borde.

6.   Tape el tubo con el tapón de caucho y agite violentamente hasta lograr la homogenización de las sustancias que contiene.

7.   Destapar con cuidado el tubo, para evitar la proyección de la mezcla y centrifugar durante 30” a 1,800 rpm.

8.   Con un aplicador, se rompe el tapón de las heces, gasas y otros restos, agitando ligeramente con el aplicador.

9.   Se vuelve a centrifugar durante 30”

10.        Se rompe nuevamente el tapón superior de restos fecales, desprendiéndolo de las paredes del tubo con cuidado, ayudándose con el aplicador.

11.        S decanta de una sola vez, procurando que quede una pequeña cantidad de 2 a 4 gotas liquidas junto con el sedimento.

12.        Agrega al sedimento una gota de lugol y agitar el tubo ligeramente para homogenizar.

13.        Con la pipeta, se toma una gota de la suspensión coloreada del fondo del tubo y se coloca en el porta y se cubre.

14.        Se observa en el microscopio con objetivos 10X y 40X.