توصيف جزئي لعزله من فيروس تبرقش وتقزم الذرة وإنتاج أجسام مضادة عديدة النسل للكشف عن الفيروس
[5]
1 - قســم علـــم النبـات - كلية العلوم - جامعة المنصورة – المنصــورة – مصـــــر
2- قسم الميكروبيولوجيا الزراعية-كلية الزراعة-جامعة عين شمس– شبرا الخيمة - القاهرة- مصر
* معهد بحوث الهندسة الوراثية الزراعية- مركز البحوث الزراعية-ص.ب. 12619- جيزة-مصـر
يعتبر
الذرة بنوعيه الشامية والرفيعة من أهم المحاصيل الزراعية فى مصر والتى تصاب بالعديد
من الأمراض الفيروسية وخاصة فيروس تبرقش وتقزم
الذرة (MDMV)
والذي يسبب نقصاَ كبيراَ فى إنتاجية المحصولين. وقد استهدفت هذه
الدراسة تعريف الـفيروس وذلك بإستخدام طرق بيولوجية وسيرولوجية وقد ثبت أن عزلة
الـ MDMV
تنتقل ميكانيكيا إلى أهم عوائل الفيروس التفريقية وهى الذرة
الشامية صنف بيونير و الذرة الرفيعة صنف ريو مسببة ظهور إصابة جهازية على كلا
النباتين (ظهور تبرقش وتبرقش شديد علي النباتين على التوالى). كما أن الفيروس أمكن
تثبيطه عند تعرضه لدرجة حرارة 55o
م لمدة إحدى عشرة دقيقة بينما درجة التخفيف النهائية للفيروس
كانت 1 : 500 وفترة بقاؤه على درجة (28±
2oم)
بصورة نشطة كانت حوالى 24 ساعة. وبفحص القطاعات فائقة الدقة المجهزة من
أوراق نبات الذرة
المصاب بالفيروس بواسطة الميكروسكوب الإلكترونى ثبت وجود محتويات داخلية إسطوانية
على شكل عجلة وتراكمات خيطية طولية وأخرى دائرية فى سيتوبلازم الخلايا المصابة.و
بتنقية الفيروس بإستخدام طريقة السكروز فى الطرد المركزى المتدرج الكثافة أنتجت
حوالى اثنين ونصف ملجم فيروس لكل مائة جرام من أوراق نباتات الذرة المصاب
بالفيروس. وقد تم الحصول على جزيئات خيطية الشكل بأبعاد تتراوح بين 725 و 750
نانوميتر فى الطول و13 نانوميتر تقريباَ فى العرض و بها غلاف بروتينى وزنه الجزيئى
39 كيلو دالتون تقريبا. و تم إنتاج أجسام مضادة عديدة النسل وقدر تركيزها فى
الإدماء الأول والثـانى والثالث بـ 1 : 1000 ، 1 : 2000 ، 1 : 1500 على التوالى.
وبالتالـي يمكـن استخدامهـا فـي الكشف عـن الفيـروس بتجهيـز وحـدة اليزا.