استخدام بصمة النسيج-النقل المناعي للكشف عن فيروس التقزم الأصفر
في الشعير
[3]
محمد إبراهيم سلامة1- إسماعيل علي عبد الحميد1- صفاء غسان قمري2-
عاطف شكري صادق3
1- معهد بحوث الهندسة الوراثية الزراعية - مركز البحوث الزراعية - ص.ب. 12619 - جيزة - مصر
2- وحدة المصادر الوراثية -أيكا ردا- ص.ب. 5466 - حلب - سوريا
3- قسم الميكروبيولوجيا الزراعية - كلية الزراعة - جامعة عين شمس - ص.ب. 68 حدائق شبرا 11241 - القاهرة - مصر
في هذه
الدراسة تم استخدام تكنيك استخدام بصمة النسيج-النقل المناعي بنجاح للكشف عن
فيروس التقزم الأصفر في الشعير وذلك في سيقان نباتات الشعير المصابة بفيروس الـ
BYDV
المنماة تحت ظروف الصوب. وقد تم الكشف عن انتيجينات الفيروس المرتبطة علي غشاء
النيتروسليلوز وذلك باستخدام الأجسام المضادة المنتجة في الماعز والمتخصصة لتلك
المنتجة في الأرانب (GAR)
والمعلمة بأنزيم الأكالين فوسفاتيز(AP)
حيث ظهر فرق واضح بين العينات النباتية المصابة بالفيروس (والتي أظهرت لون
أزرق-بنفسجي) وبين العينات الغير مصابة. وبالإضافة إلى ذلك فقد استخدم أيضا
الـ GAR
ولكنها معلمة بالذهب للكشف عن الفيروس حيث ظهر لون قرمزي في العينات النباتية
المصابة بالفيروس حيث يتواجد الفيروس والذي وجد متمركزا في أنسجة الـخشب لتلك
العينات بينما لم يظهر ذلك في العينات السليمة. ومن مميزات الطريقة أن الأماكن
الخالية في الغشاء يتم إغلاقها بواسطة البيومين سيرم البقر بتركيز 2% لمدة
ساعتين. وقد تم الكشف عن كل من الـ GAR
المعلم بالـ AP
أو الذهب والمرتبط بما في الغشاء بواسطة الـ
NBT/BCIP
ومخلوط الصبغ الفضي المحفز علي التوالي. وفي النهاية فان النتائج تثير الأنتباة
إلى إمكانية تعريف فيروسات النبات بواسطة هذا التكنيك علي الرغم من تواجد
الفيروسات بتركيزات منخفضة في النباتات.