Informe Técnico Nº 3

Estado de Avance: Finalización etapa 3: Actividades 6, 7, 8 y 9

1. Objetivos Propuestos

Contribuir a la construcción de la Palinoteca Mendoza, a partir del procesamiento de flores correspondientes a plantas representativas de la vegetación nativa presente dentro del departamento de Santa Rosa y colectadas en distintos sitios de emplazamiento de apiarios.

2. Resultados Esperados

La colección de referencia palinológica permitirá identificar el origen vegetal del polen en las mieles y granos de polen formados por Apis mellifera.

3. Actividades Desarrolladas

Se describen los materiales y métodos utilizados de cada una de las actividades que a continuación se citan. Se indican a su vez los códigos respectivos utilizados como referencia de la marcha del proyecto:

Recolección del polen (6)
Procesamiento del polen colectado (7)
Obtención de preparados palinológicos (8)
Colección de referencia palinológica (9)

La recolección del polen (6) se realizó durante la temporada apícola 2005-2006. En el campo, las flores de un conjunto de individuos de la misma especie se identifican con el sitio de emplazamiento y la fecha de recolección. En el laboratorio se herborizan las plantas de cada una de las especies en cada sitio de emplazamiento, y se conservan y agrupan las flores del conjunto de individuos en sobres. Las plantas herborizadas en el laboratorio son determinadas botánicamente en la Unidad de Fitosociología del IADIZA (Ing. Eduardo Mendez).

Es importante destacar que el sobre con las flores del conjunto de individuos de la misma especie y la especie herborizada determinada botánicamente y representativa de ese conjunto de individuos, llevan el mismo código de identificación denominado Herbario Rodrigo Facello Nº. Este código constituye el nexo, a través de los sobres con las flores, entre la Palinoteca Mendoza oficialmente depositada en el Laboratorio de Palinología Actual y Cuaternaria (IANIGLA,CRICYT) y los herbarios (láminas con plantas-tipo y general-), que quedan oficialmente depositados en el Herbario MERL, IADIZA, CRICYT.

El procesamiento del polen de las flores de cada especie vegetal, procedente de los diferentes sitios de recolección, implica previamente la extracción del polen de las anteras abiertas(7). Estas son seleccionadas mediante el uso de una lupa estereoscópica (Wild Herbrugg), lo que permite obtener una cantidad suficiente de individuos polínicos, de óptima calidad, evitando la presencia del polen inmaduro en las preparaciones palinológicas.

Con la ayuda de agujas histológicas se extrae y deposita el polen de las anteras abiertas en bandejas plásticas. Una vez el polen en las bandejas, se sella mediante una banda adhesiva la tapa para posteriormente identificar el ejemplar.

El procesamiento del polen (8) extraído de las anteras para la obtención de preparados microscópicos, involucra tres etapas:

La primera consistente en la ejecución y repetición de una serie de pasos consecutivos: trasvasamiento, ebullición, centrifugación y eliminación de líquido, que llevan a obtener una muestra concentrada de individuos polínicos.

Durante la segunda etapa se elimina la materia orgánica del polen previamente concentrado, lo que permite su observación e identificación al microscopio óptico, y hace factible la comparación de medidas y rasgos del polen de las mismas o diferentes especies . Se sigue básicamente la técnica de Faegri e Iversen (1975).
Con estos objetivos se expone el material a la acción de la solución acetolítica y del calor húmedo (ebullición mediante Baño María), para posteriormente repetir un par de veces los siguientes pasos: centrifugación, eliminación de líquido, y lavado. En ocasiones y de acuerdo a las observaciones realizadas y la experiencia adquirida en el marco de la construcción de la Palinoteca Mendoza, se ajusto el tiempo de exposición al calor y a la mezcla acetolítica durante el procesamiento del polen de ciertas especies.

Para la obtención de preparados palinológicos, es preciso realizar el montaje de la muestra-mediante pipeta de émbolo o pipeta automática-, en silicona 2000 Centistokes, sellando posteriormente el cubreobjetos al portaobjetos. Se guarda el resto del material correspondiente a la especie, el sitio y la fecha, como Material de Reserva. Una vez obtenido el preparado se codifica y se confeccionan las fichas de la Palinoteca Mendoza.

El Material de Reserva es identificado con el mismo número de Palinoteca del utilizado para el montaje del preparado ingresado y puede ser utilizado ante cualquier eventualidad que surga con el preparado original. Otra vía de reemplazo del material lo constituyen las flores y polen que quedan como reserva en el sobre.

A continuación se presenta la ficha confeccionada para cada ejemplar de Herbario determinado botánicamente que ingresa a la Colección de Referencia Palinológica (Palinoteca Mendoza) luego del procesamiento de las flores correspondientes a un conjunto de individuos de la misma especie, sitio y fecha de colecta.

Ver ficha ejemplo

Para cada ejemplar se observa su forma y simetría utilizando para ello un microscopio óptico marca Leitz-Dialux, con objetivos de 40x y 100x, y oculares 12.5 x y se toman fotografías del polen de cada especie, vista ecuatorial y polar, utilizando el mencionado microscopio. En general se utilizó el objetivo 100x para las tomas fotográficas, pero cuando el tamaño del polen excedía el cuadro de la lente fotográfica, se utilizó el objetivo 45x. Esto queda clarificado en la escala aplicada al polen en la lámina. El ocular de la cámara fotográfica tiene un aumento de 10x. Al microscopio óptico esta adosado un fotómetro marca Wild MPS 15, que permite una iluminación controlada automáticamente al momento de la toma. Los rollos fotográficos utilizados son Kodak Profesional, 400 asas.

En la actualidad dicha Palinoteca cuenta con más de 1000 ejemplares de distintas especies relevadas en el desierto de Lavalle, Precordillera de Mendoza y Cordillera de Mendoza-Quebrada Benjamín Matienzo y Polvaredas. En nuestro caso, la colección de referencia se utiliza con fines melitopalinológicos, pero su construcción permite paralelamente estudios palinológicos en rubros como aerobiología, arqueología, paleoclimatología, sistemática botánica, criminalística, nutrición, etc.

Ver álbum con los ejemplares de herbario de cada especie con el polen que los caracteriza y su ficha identificatoria

 

Comisión Evaluadora del Consejo Federal de Ciencia y Técnica - PFIP-2004

“Estudio de Flora Nativa para la producción orgánica de mieles y granos de polen”


 

 

 

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