7. Eπιθηλομεσεγχυματική μεταμόρφωση κατά τη διάρκεια της εκφύλισης των πόρων του Μüller

 

Κατά το μέσο της 15^ης μέρας οι πόροι του Müller άρχισαν να γίνονται διακοπτώμενοι και ασυνεχείς στο αρσενικό έμβρυο. Ο ανοσοφθορισμός με κολλαγόνο τύπου IV το  οποίο χαρακτηρίζει τη βασική μεμβράνη καθώς και με λαμινίνη (σχήμα 11,Α) έδειξε διάρρηξη της βασικής μεμβράνης των πόρων του Müller. Η διάρρηξη συσχετιζότανε με απόπτωση των επιθηλιακών κυτάρων (σχήμα 11Β) τα οποία διείσδυαν στο παρακείμενο μεσέγχυμα. Έτσι αποπτούμενα Κύτταρα εντοπίστηκαν στο μεσεγχυματικό διαμέρισμα (σχήμα 11,D) μόνο μετά τη διάλυση της βασικής μεμβράνης. Το ποσοστό των αποπτουμένων κυτάρων πριν την έναρξη της αλλίωσης της βασικής μεμβράνης ήταν γύρω στο 18% και μετά έφτασε το 37%. Η απώλεια της βασικής μεμβράνης, ήταν ένα γεγονός της πρώιμης επιθηλιακομεσεγχυματικής μεταμόρφωσης. Όταν η επιφάνεια που χώριζε τα επιθηλιακά με τα μεσεγχυματικά Κύτταρα διατρήθηκε, τότε, τα επιζώντα Κύτταρα στο επιθήλιο άλλαξαν την οριοθέτησή τους για να εισέλθουν στο μεσεγχυματικό διαμέρισμα. Τα επιθηλιακά Κύτταρα που εισείλθαν στο μεσέγχυμα περιγράφονται ως περίβλημα κυτάρων που μοιαζουν στο μεσέγχυμα τα οποία περιβάλλουν το επιθήλιο των πόρων του Müller (σχήμα 11,Ε) 

Τα οποία υπερεκφράζουν τη βιμεντίνη (δεν φαίνεται στο σχήμα). Η απόπτωση λόγω της διάλυσης της βασικής μεμβράνης είναι ένα κύριο γεγονό στην εκφύλιση των πόρων του Müller και παρουσιάστηκε με την μείωση των κυτάρων στο επιθήλιο του πόρου του Müller στο αρσενικό έμβρυο. Την 16^η μέρα φαίνεται έντονα η μείωση των κυτάρων στον πόρο του Müller στο σχήμα 11,F-G

 

 

 

Σχήμα 10.

 

Παρουσία της ΑΜΗ και μοριακός μηχανισμός σηματοδότησης μέσω Wnt(σχήμα 13)

 

Αυτή η υπόθεση δεν ισχύει για το  wnt7a και wnt4 αφού η παρουσία τους δεν αυξάνει την κυτταροπλασματική συγκέντρωση της β-κατενίνης.

Αλλά φαίνεται ότι η ΑΜΗ έμμεσα επηρεάζει τη σηματοδότηση άλλων wnt, διαμέσου της αύξησης της β-κατενίνης στα μεσεγχυματικά Κύτταρα η οποία έχει θετική συσχέτιση (r à 1) δηλαδή σε στατιστικές μελέτες βρέθηκε στατιστικά σημαντική εξάρτηση της παρουσίας β-κατενίνης με τα επίπεδα αποπτούμενων επιθηλιακών κυτάρων. Επιπρόσθετα ο συνεντοπισμός της β-κατενίνης μαζί με τον ενδοπυρηνικό LEF1 (σχήμα 14)  πιθανότατα να οδηγεί σε αλλαγές στην έκραση των γονιδίων στα μεσεγχυματικά Κύτταρα και στη μοίρα του κυτάρου κατά τη διάρκεια της απόπτωσης των πόρων του Müller. Έτσι η β-κατενίνη μπορεί να θεωρηθεί ως ένας μεσολαβητής της δράσης της ΑΜΗ στα μεσεγχυματικά Κύτταρα γύρω από τον πόρο του Müller, καθώς και σε άλλα Κύτταρα.

 

 

 

Σχήμα 11

Α:Εγκάρσια τομή κρυοστάτη με αντι της λαμίνης αντίσωμα

B,C: Γειτονικές τομές με παραφίνη-επιθ. Κυτ. Σε απόπτωση

        με διάρρηξη βασικής μεμβράνης.(TUNEL + cell)

 

D: Μεγ.βελη-ΤUNEL+ στο ΜD, Μικρά βέλη-TUNEL+ στο

μεσέγχυμα

 

 

E: Eπιθηλιομεσεγχ.μεταμορφ-> μεσεγχυματικό

Περίβλημα περιξ του πόρου του Müller

 

 

F-G: Ανοσοανίχνευση Eπιθ. Κ.  πόρων Müller/wolff στη 15η μέρα(F) και 16η, με αντι-κερατίνη(αντίσωμα). Φαίνεται καθαρά μείωση επιθηλίου των Μull. Ducts (MD)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Σχήμα 12

Δομή β-κατενίνης (beta-catenin). Στην πιο πάνω εικόνα φαίνεται η στερεοδομή spacefill της Xtcf3-CbdBETA-Catenin. Με ακραίο μπλε χρώμα παρουσιάζονται τα πλήρως υδρόφιλα μόριά της και με βαθύ κόκκινο τ α πλήρως υδρόφοβα. Τα ενδιάμεσα χρώματα είναι περιοχές με μερική υδροφιλία ή υδροφοβία. Από www.ncbi.nlm.nih.gov και επεξεργασμένο με το πρόγραμμα Cn3D.

 

 

Σχήμα 13

Δομική βάση για την αναγνώριση της Dep μονάδας στην οδό για το σήμα Wnt. (Από www.ncbi.nlm.nih.gov και επεξεργασμένο με το πρόγραμα Cn3D.

 

Σχήμα 14

Εικόνα από πυρηνικό μαγνητικό συντονισμό δευτεροταγούς δομής του παράγοντα ενίσχυσης λεμφοεϊδούς-1 (LEF1) το οποίο εντοπίζεται στον πυρήνα των μεσεγχυματικών κυτάρων μετά τη δράση της AMH και τις αντιδράσεις τύπου καταρράκτη που πυροδοτούνται από τον υποδοχέα AMHRII (o οποίος είναι διαμεμβρανική πρωτεϊνη σερίνης-θρεονίνης). Στο πιο πάνω σχήμα φαίνεται ξεκάθαρα πως η περιοχή Hmg από την LEF1 επιδρά σε ένα τμήμα DNA 15 bp (κόκκινη διπλή έλικα). Από το πρόγραμμα www.ncbi.nlm.nih.gov και επεξεργασμένο με το πρόγραμμα Cn3D.

 

 

Πιέστε το πλήκτρο BACK στον πλοηγό σας για επιστροφή στο κυρίως μενού.