Autores:
Sotullo, A.; Verwimp, V.; Riveros, M.; Pauli, R. & Tonarelli, G.
Fuente:
Veterinary Microbiology 79, 111-121. (2001).
El Virus de la Anemia Infecciosa Equina
(VAIE) es un miembro de la subfamila Lentivirus de los Retroviridae, que causa infección crónica, de dispersión mundial en
la familia Equidae;. se ha evidenciado en caballos, burros
y mulas. Una vez un animal es infectado, permanece en tal condición por el
resto de su vida. El virus posee las glicoproteínas de superficie gp90 y gp45 y
cuatro proteínas internas mayores, no glicosiladas, conocidas como p26, p15,
p11 y p9. La prueba oficialmente aprobada por la Organización Internacional de
Epizootias (OIE) para el diagnóstico de esta enfermedad es la conocida como
prueba de Coggins, una prueba de Inmunodifusión en Gel Agar (AGID) para
detectar anticuerpos precipitantes contra la proteína estructural p26. Un
resultado positivo en la prueba de Coggins confirma que el virus está presente,
pero la prueba sólo se torna positiva 15-25 días pos inoculación. El objetivo
de este trabajo fue evaluar el comportamiento de una prueba Inmuno-Enzimática
(ELISA) para el VAIE utilizando péptidos sintéticos lineares y cíclicos a
partir de gp90 y gp45. Esta prueba podría ser valiosa para tamizajes
serológicos a gran escala para la enfermedad y para el diagnóstico de la AIE en
fases tempranas de la infección, cuando los resultados de la prueba tradicional
de Coggins sean aun negativos. Para el estudio se sintetizaron tres péptidos
derivados del VAIE, los péptidos identificados como gp90-I y gp90-II
corresponden a las porciones terminales N- y C- de la glicoproteína de
superficie gp90. El péptido gp45-I sobrepone al epítope inmunodominante
CIERTHVFC de la glicoproteína de transmembrana gp45 e incluye una cadena
hidrofílica cercana al extremo N-terminal de esta asa no peptídica. Se
utilizaron muestras de suero de 140 caballos naturalmente infectados con VAIE y
un panel de 167 sueros no inmunes obtenidos de equinos no infectados. Las diferencias
en la reactividad entre sueros positivos y negativos fueron claramente
distinguidas. Muestras consideradas como débiles positivas en la prueba AGID,
resultaron positivas “verdaderas” en la ELISA. Estos resultados son
consistentes con la mejor sensibilidad de la ELISA en comparación con la prueba
AGID. El péptido cíclico que imita la secuencia inmunodominante de gp45
demostró excelente reactividad, sugiriendo de esta manera que su actividad
funcional depende significativamente de su conformación, ya que una reactividad
muy baja se observó en la forma linear del péptido. Los índices de
detectabilidad de sueros positivos y negativos alcanzaron el 98% cuando los
péptidos sintéticos gp90-II y gp45-i fueron usados en la misma prueba,
ilustrando la alta especificidad y sensibilidad de esta prueba. Este estudio
representa un primer abordaje para el desarrollo de un kit diagnóstico, que
permitirá el rápido análisis de un gran número de muestras de suero de caballos
y que pudiera ser aplicado en áreas endémicas con diferentes prevalencias de la
infección. Este interesante estudio desarrollado por la Dirección de Sanidad
Animal de Argentina demuestra la bondad del uso de herramientas de la biología
molecular para el diagnóstico y control de enfermedades animales.
Resumen preparado por: Jaime Hernández, Andrey Castro & Efraín Benavides O.