Noticias Epidemiológicas Veterinarias, Volumen 4, No. 22 (2003)

 

Relación Genética entre Cepas de Trypanosoma evansi mediante Amplificación Aleatoria de DNA Polimórfico y Evaluación de un Fragmento Sinapomórfico de DNA para el Diagnóstico Especifico de Especies

 

 

Autores: Ventura, R.M.; Takeda, G.F.; Silva, R.A:M.S.; Nunes, V.L.B; Buck, G.A & Teixeira, M.M.G.

Fuente: International Journal for Parasitology 32, 53-63. (2002).

 

Resumen

 

El Trypanosoma evansi es una especie de parásito del subgénero Trypanozoon (Salivaria) con mayor distribución geográfica y de huéspedes mamíferos que cualquier otra especie del género, el cual es transmitido mecánicamente por insectos hematófagos; diferenciándose así de Tripanosoma brucei, el cual es trasmitido cíclicamente por la mosca Tsetsé. En Sudamérica T. evansi es transmitido por moscas y vampiros y se encuentra en Venezuela, Colombia, Argentina, Bolivia y Brasil, donde se ha sugerido que el ganado puede desarrollar un curso crónico sin signos clínicos, siendo los Coatís, Los capibaras y el ganado, los principales reservorios del organismo. El método más confiable para el diagnóstico de T. evansi continúa siendo el parasitológico directo, pero es de baja sensibilidad y su especificidad depende de la capacidad de una identificación morfológica acertada. Las herramientas moleculares pueden ser de valor como ayuda diagnóstica para el diagnóstico de especie, principalmente en Sudamérica, donde son comunes infecciones mixtas con especies de Tripanosoma del grupo Salivaria y Stercoraria. En este estudio se emplearon patrones de Amplificación Aleatoria de DNA Polimórfico (RAPD) para evaluar la relación genética entre 14 cepas brasileras de T. evansi provenientes de huéspedes domésticos y salvajes, las cuales presentaban diferentes características biológicas. Estas cepas akinetoplásticas fueron comparadas entre sí contra tres cepas diskinetoplasticas de T. evansi provenientes del Viejo Mundo (Etiopia, China y Filipinas) y también con Trypanosoma equiperdum, Trypanosoma brucei brucei, Trypanosoma brucei gambiense y Trypanosoma brucei rhodesiense. El análisis de RAPD demostró una limitada heterogeneidad en cepas de T. evansi provenientes de diferentes huéspedes y diferentes regiones geográficas del mundo, o en otras especies del subgénero Trypanozoon. Sin embargo el análisis de pequeñas variaciones generadas en la amplificación aleatoria de DNA polimórfico demostró un patrón consistente en un único fragmento sinapomórfico de DNA (Llamado Te664) para el grupo de T. evansi que no fue detectado en otras especies de Trypanosoma investigados. El análisis de electroforesis en gel de campo pulsado demuestró que el fragmento Te664 es una secuencia repetitiva, que se halla dispersa en los minicromosomas de T. evansi.  Basados en esta secuencia, se desarrollo un ensayo PCR convencional para la detección de T. evansi, usando preparaciones crudas de sangre recolectada sobre láminas o en papel filtro como plantilla para el DNA. Los resultados demostraron que esta técnica puede ser utilizada como herramienta diagnóstica en estudios epidemiológicos de campo de T. evansi. Este estudio basado en la caracterización genética de Trypanosoma evansi por medio de la técnica RAPD generó un fragmento de DNA específico para esta especie; de esta manera de avanza en el perfeccionamiento de técnicas de diagnóstico basadas en PCR; con las cuales se reduciría la problemática actual para diferenciar al T. evansi de otros Trypanosomas pertenecientes al subgénero Trypanozoon.

 

Resumen preparado por: Paola García y Efraín Benavides

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