Noticias Epidemiológicas. Volumen 2, No 8
RESPUESTA DE ANTICUERPOS A LA INFECCION POR
Babesia bigemina EN TERNEROS, MEDIDA POR LAS TECNICAS DE ELISA E
INMUNOBLOTING
Seminario presentado por: Clara Garzón Almanza, Noviembre 17 de 1998.
Fuente :
J.V. Figueroa; J.A. Alvarez; G.M. Buening; J.L. Cantó; R. Hernández; M. Monroy;
J.A. Ramos & C.A. Vega. (1992) Revista Latino-Americana de Microbiología, 34,
267-273.
Para
medir la respuesta de anticuerpos contra B. bigemina mediante una prueba
de ELISA, se infectaron experimentalmente tres grupos de terneros con dos
aislamientos del parásito. Fue posible demostrar anticuerpos específicos
acoplados directamente al parásito, reaccionando tan temprano como 7 días post
inoculación (p.i.) El más alto nivel de anticuerpos fue obtenido alrededor de
los días 21-23 p.i. y permanecieron detectables por 260 días. El desafío de los
animales 260 días p.i., mediante infección inducida por garrapatas portadoras
de B. bigemina, demostró que los terneros desafiados con la cepa
homóloga no presentaron incremento en
los niveles de anticuerpos IgG, mientras que aquellos desafiados con el
aislamiento heterólogo sí lo hicieron. En este último grupo de animales el
nivel resultante de anticuerpos fue aún mayor que luego de la infección
primaria. La técnica de Inmunobloting demostró que la respuesta de anticuerpos
está probablemente dirigida a grupos de componentes de B. bigemina con
una movilidad relativa de 68-64 kDa, 62-54KDa, y 52-54 kDa, los cuales parecen
ser los mayores componentes del protozoario. Observando la reactividad cruzada
antigénica entre siete aislamientos de B. bigemina, se demostró que
estos componentes no están restringidos a un solo aislamiento. El parásito
utilizado para las inoculaciones y los ensayos Elisa y Western-Blot fue una
cepa de B. bigemina originaria de México, adaptada a cultivo in vitro.
La cepa Texcoco de B. bigémina, aislada de un caso clínico, fue utilizada como
cepa heteróloga. La preparación del antígeno consistió en la concentración de
eritrocitos infectados mediante gradientes de densidad, lisis por shock
hipotónico y extracción en presencia de detergente. Como control de la prueba
se utilizaron eritrocitos bovinos normales, a los que se le dio el mismo
tratamiento. Por fluorescencia se detectó que B. bovis tiene gran
cantidad de antígenos comunes que producen reacción cruzada; un suero anti- B.
bovis no reconoció antígenos comunes al ser confrontado contra siete
aislamientos de B. bigemina diferentes, por ELISA e Inmunobloting. Se ha
demostrado que existen diferencias antigénicas entre aislamientos de B.
bigemina pero se ha observado que comparten antígenos entre ellos. Los
componentes parasitarios de pesos moleculares 62-54 Kda, y 52-42 KDa contienen
epítopes que están presentes en todos los aislamientos. Estos epítopes pueden
ser candidatos potenciales para ser evaluados como inmunógenos. Esta
información es relevante para el Programa de Epidemiología Veterinaria (EpiVet)
por el valioso aporte de información a sus dos proyectos que tratan sobre el
tema: tanto el de producción de vacunas contra hemoparásitos, como el de
desarrollo de pruebas para el diagnóstico poblacional. El conocer que epítopes
parasitarios están específicamente ligados a protección inmune, permitirá hacia
el futuro pensar en el uso de vacunas muertas basadas en estos epítopes, bien
mediante la creación de péptidos sintéticos o tal vez secuenciando estas
proteínas y logrando su producción artificial en un vector procariote.