Programa Nacional de Epidemiología Veterinaria CORPOICA-CEISA.

 

Noticias Epidemiológicas, Volumen 1, Nº 2

 

EXPRESION Y CUANTIFICACION DE MOLECULAS  IgG e IgM  EN LA SUPERFICIE DE LOS LINFOCITOS DE GANADO INFECTADO CON EL VIRUS DE LA LEUCOSIS BOVINA

 

Seminario presentado por: Clara Garzón Almanza, Febrero 23 de 1998.

Fuente: M.Levkut, W. Ponti, D. Soligo,N.Quirici, M.Rocchi, G. Lambertenghi Deliliers.(1995). Reseach in Veterinary Science 59, 45-49.

 

Resumen

 

Para evaluar la expresión y cuantificación de moléculas IgG e IgM en la superficie de los linfocitos fueron usados anticuerpos marcados con partículas de oro coloidal en microscopía electrónica de barrido y anticuerpos marcados con fluorescencia en cytometría de flujo.Los animales fueron divididos serológica y hematológicamente en tres grupos:  3 vacas (BLV+PL+), 4 vacas (BLV+PL-), y  2 vacas (BLV-PL-). PL: linfocitosis persistente.

El porcentaje de producción de IgM e IgG en la células, fue significativamente más alto en el grupo (BLV+PL+) que en los grupos (BLV+PL-) y (BLV-PL-) . La intensidad de expresión de IgM fue más alta en el grupo  (BLV+PL+) que en los grupos (BLV+PL-) y (BLV-PL-) . La intensidad de expresión de IgG fue aproximadamente la misma en los tres grupos determinada por FACS o SEM. Un incremento en el número de células grandes con IgM ,fue obsevado en los grupos (BLV+PL+) y (BLV+PL-). El análisis por Sem ,fue más sensible que el de FACS en este experimento.

 

La Leucosis enzoótica bovina es una enfermedad linfoproliferativa crónica que puede inducir a una lifocitosis persistente y o a la proliferación de tumores en ganado. La infección está asociada con cambios en la respuesta inmune del ganado. Hay algunas discrepancias en la descripción de la expresión de inmunoglobulinas Ig en el suero: Pierce en 1977 reportó que el ganado (BLV+PL+) tenia altos niveles de IgM en suero,Gatei en 1990 observó que la conentración de IgM en el suero fue baja en los animales (BLV+PL+).En el presente  estudio se demostró que hay mayor expresión y cuantificación de las moléculas IgM en la superficie de los lifocitos de los animales del grupo (BLV+PL+) y que la expresión de IgG no varía en los tres grupos.

 

Se utilizaron simultaneamente los métodos: Microscopía electrónica de barrido SEM y cytometria de flujo FACS, estas son técnicas inmunológicas que tienen como principio básico: a) los antígenos que son las moléculas IgM o IgG en la superficie de los lifocitos, b) los anticuerpos monoclonales específicos IgM o IgG  c) una inmunoglobulina antirratón conjugada con partículas de oro coloidal para SEM o con  Phicoerytrina que produce la fluorescencia para FACS.

Para determinar la expresión de las moléculas se evaluaron las células individualmente contado las partículas de oro coloidal en 100 células en el caso de SEM, o midiendo la intensidad de la fluorescencia en FACS. Para la cuantificación se obtuvo el porcentje total de linfocitos positivos para IgG o IgM.

 

El SEM puede ser un test altamente sensible para identificar animales (BLV+PL-) que subsecuentemente desarrollarán lifocitosis,esto es importante porque los animales ( BLV+PL+) tienen mayor  tendencia a desarrollar la enfermedad. Se ha encontrado que en la linfocitosis persistente , los linfocitos presentan cambios; aparecen células B inmaduras y se pueden encontrar antígenos asociados a tumor. Las moléculas IgG son secretadas predominantemente en el plasma, un bajo nivel de estas está presente en la superficie de los linfocitos.

 

Este estudio permite investigar la fisiopatología de la infección por BLV, conocer respuestas inmunológicas,poder comparar los animales sanos con los infectados ,para en un momento dado tomar medidas de control.