|
1. ถ้าใช้ Organic Solvent ทั่วๆไปเป็น Mobile Phase ให้ล้างด้วย 70%MeOH ประมาณ 30-45 นาทีแล้วเก็บ
Column ใน 70%MeOH หรือ100% MeOH ไม่ควรเก็บ Column ใน 100%H2O เนื่องจากน้ำมีพวกจุลินทรีย์ต่างๆ
ทำให้ Column เสียเร็ว
2. ถ้าใช้ Buffer เป็น Mobile Phase หลังการใช้งานเสร็จแล้วให้ล้าง Column ทันทีไม่ควรทิ้งค้างคืนโดยในการล้าง
นั้นให้เปลี่ยนจากการใช้อัตราส่วนของ Buffer เป็นน้ำแทน แล้ว run เครื่องเป็นเวลา 60 นาที เช่น Mobile Phase
ที่ใช้เป็น Buffer : MeOH 80:20 ให้เปลี่ยนจาก Buffer มาเป็นน้ำแทน โดย run เป็น H2O : MeOH 80 : 20 ประมาณ
60 นาที จากนั้นเพิ่มอัตราส่วนของ MeOH เป็น 100% ประมาณ 30 นาที จากนั้นเก็บ Column ใน 100%MeOH
3. ในกรณีที่เราใช้ Column ไปนานๆ ประสิทธิภาพในการแยก Column จะลดลง ทั้งนี้อาจเนื่องมาจากสารที่เรา
ฉีดเข้า Column ถูกล้างออกมาไม่หมด เมื่อสะสมนานๆ ประสิทธิภาพในการแยกของ Column ก็จะลดลง ดังนั้นเรา
ต้องทำการ Regenerate Column ซึ่งเป็นวิิธีการใหญ่ มีวิธีดังนี้
ขั้นที่ 1. ล้าง Column ด้วย 70%H2O / 30%ACN Flow 1.0 mL/min อย่างน้อยประมาณ 10 Column Volumn
( Column 25 cm.ล้างปะมาณ 45 นาที Column 15 cm. ล้างประมาณ 25 นาที )
ขั้นที่ 2. ล้างด้วย Chloroform 100% Flow 1.0 mL/min ประมาณ 10 Column Volumn
ขั้นที่ 3. ล้างด้วย 95%ACN / 5%%H2O Flow 1.0 mL/min ประมาณ 10 Column Volumn
ขั้นที่ 4. ผ่าน Mobile Phase ที่เราจะใช้งานแล้ว run ตามปกติ
|