Vitamin C mudah teroksida apabila terdedah kepada udara. Kandungan vitamin C dalam buah – buah yang dibiarkan lama berkurang kepekatannya kerana vitamin C telah dioksidakan oleh udara. Buah – buahan yang diimport sering mengalami masalah ini kerana buah – buahan yang diimport melalui kapal memerlukan masa yang lama untuk sampai ke negara kita dan telah lama didedahkan kepada udara.

    Jus Limau yang tidak segar mengandungi kandungan vitamin C yang rendah berbanding dengan jus limau yang segar. Kepekatan kandungan vitamin C dalam jus limau dipengaruhi oleh masa jus limau terdedah kepada udara.

    Kepekatan jus limau kasturi akan berubah mengikut tempoh masa terdedah kepada udara. Jus limau kasturi yang semakin lama terdedah kepada udara, kandungan vitamin C nya semakin kurang. Sebaliknya, jus limau kasturi yang semakin segar mempunyai kepekatan vitamin C yang semakin tinggi.

Pembolehubah tak bersandar: Masa jus limau kasturi didedahkan kepada udara

Pembolehubah bersandar: Kepekatan vitamin C dalam jus limau.

Pembolehubah dimalarkan: -Kepekatan (0.1%) dan isipadu (1ml) DCPIP yang digunakan

                                               -Kepekatan vitamin C ( asid askorbik - 0.1%) yang digunakan.

    Skop kajian bagi eksperimen DCPIP ini adalah untuk membandingkan kepekatan vitamin C antara beberapa sampel jus limau kasturi yang telah didedahkan kepada udara dalam tempoh masa yang berlainan. Eksperimen DCPIP ini dijalankan demi menentukan kandungan vitamin C dalam jus limau kasturi yang hendak dikaji. Kepekatan vitamin C melalui eksperimen ini dapat ditentukan dengan mencatatkan isipadu jus limau kasturi yang diperlukan untuk melunturkan warna 1ml larutan DCPIP. Semakin sedikit jus limau kasturi yang diperlukan untuk melunturkan warna larutan DCPIP maka semakin tinggi kepekatan vitamin C dalam jus itu. Larutan DCPIP bertujuan untuk mengesan kehadiran vitamin C dalam sesuatu sampel jus limau kasturi. Apabila kepekatan vitamin C adalah kurang pekat, kerana pengoksidaan berlaku, lebih banyak isipadu jus limau kasturi diperlukan untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP. Oleh itu, isipadu yang lebih banyak diperlukan untuk melunturkan larutan DCPIP. Ini disebabkan kandungan vitamin C dalamnya telah dioksidakan oleh oksigen dalam udara dan menyebabkan turunnya kepekatan vitamin C dalam jus tersebut.

1. 5 buah bikar kecil
2. 5 buah bekas plastik
3. Jus Limau Kasturi yang telah siap diperah
4. Larutan DCPIP (diklorofenolindofenol)
5. Picagari berjarum
6. Penutup
7. 5 buah tiub spesimen
8. Pisau kecil
9. Jubin putih

    Sebelum menjalankan eksperimen, diketahui bahawa jus-jus buah-buahan seperti jus betik, jus oren dan jus belimbing mengandungi vitamin C. Di samping itu, kandungan vitamin C dalam buah limau kasturi juga diketahui sebelum bermulanya menjalankan eksperimen. Buah-buahan yang mudah diperoleh, murah dan berkepekatan vitamin C yang tinggi dicari sebelum menjalankan eksperimen.

1. Jus limau diperah daripada limau kasturi setiap hari selama 5 hari. Kemudian jus itu masing – masing dimasukkan ke dalam 5 bekas yang berpenutup.
2. Bekas yang mengandungi jus limau yang diperah pada hari pertama didedahkan kepada udara satu jam setiap hari selama 5 hari. Selepas didedahkan kepada udara, bekas itu disimpan dalam peti sejuk untuk mengelakkan pengoksidaan selanjutnya dan mengekalkan kesegarannya.
3. Bekas kedua yang mengandungi jus limau yang diperah pada hari kedua juga didedahkan kepada udara satu jam setiap hari selama 4 hari. Begitu juga dengan bekas yang mengandungi jus limau yang diperah pada hari ketiga didedahkan selama 1 jam selama 3 hari dan bekas yang mengandungi jus limau yang diperah pada hari keempat didedahkan kepada udara selama satu jam setiap hari selama 2 hari. Bekas yang kelima pula adalah jus limau segar yang baru diperah dan tidak didedahkan untuk pengoksidaan. Bekas keenam pula menyimpan asid askorbik (Vitamin C) 0.1% yang bertindak sebagai kawalan.
4. Pada hari kelima, selepas semua jus limau telah disediakan, jus limau daripada setiap bekas yang disediakan pada berlainan hari disuntik dengan picagari ke dalam 5 bikar masing – masing mengandungi 1 ml larutan DCPIP untuk menguji kepekatan kandungan vitamin C dalam jus limau itu. Ujian untuk asid askorbik juga diuji untuk membuat perbandingan nanti.
5. Kandungan asid askorbik dalam unit peratus(%) dan mg/ ml bagi jus limau kasturi dalam setiap bekas ditentukan dengan menggunakan rumus berikut:

Data – data yang dikumpul semasa ujian dijalankan dicatatkan dalam jadual seperti di bawah:-

Ö = warna biru masih kelihatan dalam botol

´ = warna biru sudah dilunturkan

KB0203 Memilih teknik, radas dan bahan yang sesuai dengan kajian

    Teknik yang akan digunakan untuk pengujian ialah teknik ujian kepekatan asid askorbik dengan mengkajikan isipadu jus yang diperlukan untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP

    Apabila menggunakan picagari, jarumnya mesti dimasukkan sehingga ke bahagian bawah permukaan larutan DCPIP apabila menambahkan vitamin C (asid askorbik) atau jus buah limau kasturi ke dalamnya untuk menguji kepekatannya. Teknik ini adalah untuk memastikan udara tidak masuk ke dalam larutan DCPIP yang akan mengoksidakan vitamin C atau jus buah limau kasturi dan akan mengoksidakan semula larutan DCPIP yang telah dilunturkan. Keadaan ini berlaku kerana udara (oksigen) boleh mengoksidakan vitamin C atau jus buah limau kasturi dan seterusnya mengembalikan semula warna biru larutan DCPIP yang luntur itu. Ini akan menjejaskan keputusan eksperiman yang telah dijalankan itu.

    Picagari digunakan untuk menyukat isipadu asid askorbik, isipadu jus limau kasturi dan isipadu larutan DCPIP kerana skala picagari dapat memberi bacaan lebih tepat atau jitu semasa ujian. Di samping itu, picagari juga dapat mengurangkan peluang asid askorbik atau jus limau kasturi teroksida semasa cuba menyuntikkan jus itu ke dalam bikar yang mengandungi larutan DCPIP.

    Buah limau kasturi digunakan dalam eksperimen ini kerana buah ini lebih murah, mudah diperoleh dan mudah disediakan jika dibandingkan dengan belimbing atau nanas dan buah – buahan yang lain. Di samping itu, kepekatan vitamin C dalam jus limau kasturi juga adalah lebih tinggi dan agak konsisten.

Radas dan bahan yang digunakan dalam eksperimen ialah

1. 5 buah bikar kecil
2. 5 buah bekas plastik
3. Jus Limau Kasturi yang telah siap diperah
4. Larutan DCPIP (diklorofenolindofenol)
5. Picagari berjarum
6. Penutup
7. 5 buah tiub spesimen
8. Pisau kecil
9. Jubin putih

1. Kaedah – Penyediaan Jus Limau Kasturi

    Limau kasturi yang segar diperolehi dan diperah ke dalam satu bekas plastik yang berpenutup pada hari yang pertama. Jus Limau itu dibiarkan terdedah kepada udara (untuk dioksidakan) selama satu jam sehari selama 5 hari. Selepas didedahkan kepada udara selama satu jam, jus limau kasturi disimpan dalam peti sejuk untuk mencegah jus kasturi daripada rosak. Langkah ini diulang selama 4 hari yang seterusnya.

    Limau kasturi yang segar juga diperah ke dalam bekas berpenutup yang lain pada hari kedua. Dengan langkah yang sama dengan langkah di atas, jus limau itu juga didedahkan kepada udara selama 1 jam sehari untuk 4 hari untuk dioksidakan.

    Limau kasturi yang segar juga diperah pada hari ketiga ke dalam bekas berpenutup yang ketiga dan didedahkan kepada udara satu jam selama 3 hari. Limau kasturi yang segar juga diperah pada hari keempat ke dalam bekas berpenutup yang keempat dan didedahkan kepada udara satu jam selama 2 hari. Bagi hari kelima, limau kasturi yang segar diperah ke dalam bekas plastik yang kelima. Penyediaan lima jenis spesimen yang berkeadaan yang berlainan dan semua spesimen ini akan diuji pada hari kelima. Pengujian asid askorbik juga dilakukan sebagai kawalan dan untuk membandingkan keputusan.

2. Kaedah – Ujian Kepekatan Asid Kasturi Dengan Larutan DCPIP

1. Semasa asid askorbik disuntikkan ke dalam larutan DCPIP, jarum picagari dipastikan adalah di bawah perrmukaan larutan DCPIP.
2. Limau kasturi yang digunakan dipastikan segar dan diiperolehi dari pokok yang sama supaya kepekatan vitamin C yang terkandung adalah lebih kurang sama.
3. Bikar kecil yang mengandungi campuran larutan DCPIP dan jus limau kasturi dipastikan tidak digoncangkan.

    Apabila jus limau kasturi ditambahkan ke dalam larutan DCPIP, warna biru DCPIPdilunturkan secara perlahan-lahan . Didapati warna biru DCPIP mula terluntur dari bahagian tengah dasarnya dan akhirnya merebak ke seluruh larutan DCPIP. Jus limau kasturi yang yang terdedah paling lama kepada udara iaitu bikar 1 didapati memerlukan isipadu yang paling banyak untuk melunturkan warna biru DCPIP . Manakala , jus limau yang terdedah kepada udara dalam masa paling pendek diperlukan dalam kuantiti isipadu yang sedikit untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP.m Ini berlaku pada bikar 5.

Ö = warna biru masih kelihatan dalam botol

´ = warna biru sudah dilunturkan

    Semasa mencampurkan asid askorbik kepada larutan DCPIP, larutan DCPIP tidak digoncang kerana oksigen dalam udara mungkin akan mengoksidakan asid askorbik dan ini akan meningkatkan isipadu asid askorbik yang diperlukan untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP. Ini berlaku kerana oksigen dari udara akan mengoksidakan semula larutan DCPIP yang telah dilunturkan. Ini menyebabkan warna larutan DCPIP bertukar balik menjadi biru semula. Maka lebih banyak isipadu jus limau kasturi diperlukan untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP. Dengan ini keputusan menjadi tidak tepat. Berdasarkan keputusan yang diperoleh, didapati isipadu jus limau kasturi sebanyak 4.7ml diperlukan untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP bagi bikar satu. Ini adalah kerana jus limau kasturi dalam bikar 1 terdedah kepada udara paling lama iaitu 4 jam. Pendedahan yang paling lama ini menyebabkan paling banyak kandungan Vitamin C di dalamnya telah dioksidakan oleh oksigen yang terdapat di dalam udara.

    Keputusan ini diikuti dengan bikar 2, 3, 4 dan 5. Isipadu jus limau kasturi yang diperlukan untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP adalah berlainan bagi setiap bikar yang berlainan kerana masa pendedahan bikar – bikar itu adalah berbeza. Jika diperhatikan, didapati satu susunan menurun bagi isipadu jus limau kasturi yang diperlukan untuk melunturkan warna biru DCPIP terbentuk dari bikar 1 ke bikar 5. Masa pendedahan yang lebih singkat memerlukan isipadu jus limau kasturi yang sedikit untuk melunturkan warna biru larutan DCPIP. Secara bandingan, didapati bikar 5 memerlukan isipadu jus limau kasturi yang paling sedikit kerana masa pendedahan adalah sifar.

    Isipadu jus limau yang diperlukan untuk melunturkan warna larutan DCPIP berkadar lansung dengan tempoh jus didedahkan kepada udara. Kepekatan vitamin C berkurang dengan bertambahnya masa pendedahan. Di sini, asid askorbik disediakan sebagai eksperimen kawalan.

    Semakin lama jus limau kasturi terdedah kepada udara, semakin banyak isipadu jus limau diperlukan untuk melunturkan larutan DCPIP. Ini menunjukkan kepekatan Vitamin C menurun dengan bertambahnya masa pendedahan kepada udara. Keadaan ini berlaku disebabkan oleh kandungan vitamin C itu telah dioksidakan . Dengan ini, terbuktilah hipotesis yang telah dibuat itu adalah benar.

    Buah limau kasturi yang digunakan untuk uji kaji ini mungkin sudah rosak atau tidak segar lagi. Ini akan mengganggu keputusan eksperimen ini. Oksigen dari atmosfera yang larut dalam jus limau kasturi ketika jus itu dibiarkan terdedah juga akan menjejaskan keputusan eksperimen.

    Cara pendedahan jus limau kasturi kepada udara yang mengambil masa lima hari itu dapat dilakukan dalam 1 hari sahaja. Sepanjang tempoh 5 jam dalam hari tersebut, kelima-lima bekas kecil yang diisi dengan jus limau kasturi dibiarkan terdedah kepada udara pada masa yang sama dan di tempat yang sama. Selepas 1 jam, salah satu daripada bekas itu akan ditutup dan disimpan dalam peti sejuk. Langkah ini diulangi untuk bekas-bekas yang berikutnya sehinggalah jam yang kelima sudah berlaku, iaitu selepas semua bekas telah ditutup dan disimpan dalam peti sejuk. Langkah ini bertujuan untuk memastikan semua jus didedahkan kepada udara pada suhu dan cuaca yang sama dalam satu hari. Pada masa yang sama, bahan uji iaitu larutan DCPIP disediakan dengan segera supada ujian kepekatan Vitamin C dapat dijalankan dengan cepat. Ini untuk memastikan semua jus limau masih segar dan mengandungi kepekatan Vitamin C yang kemuncak demi membuat keputusan eksperimen lebih jitu. Selain itu, suhu juga ditetapkan agar tidak mempengaruhi keputusan eksperimen. Walau bagaimanapun, aras awal jus limau kasturi dalam semua bekas perlu ditandakan sebelum memulakan pendedahan kepada udara. Jika didapati aras jus menurun, air suling ditambahkan untuk menetapkan kepekatan jus limau kasturi sepanjang eksperimen ini. Selain itu, sebaik-baiknya buah kasturi itu diperoleh dari sebatang pokok yang sama untuk memastikan semua buah limau kasturi itu mengandungi kepekatan vitamin C yang sama sebelum memulakan eksperimen.

    Jarum picagari yang dimasukkan sehingga ke dasar larutan DCPIP ketika menyuntikkan jus limau kasturi yang mengandungi vitamin C itu membolehkan kepekatan asid askorbik ditetapkan. Ini adalah kerana udara tidak akan masuk ke dalam larutan DCPIP dan mengoksidakan asid askorbik atau mengoksida semula larutan DCPIP yang telah dilunturkan. Teknik ini dapat memberi keputusan yang lebih tepat dan jitu.

    Eksperimen ini dijalankan selama lima hari. Dalam tempoh ini, cuaca sekeliling adalah tidak tetap. Oleh itu, suhu tidak dapat dimalarkan untuk eksperimen ini.

    Penyejatan juga mungkin berlaku sepanjang tempoh pendedahan jus limau kasturi kepada udara. Maka, aras asal jus limau kasturi dalam bekas perlu ditanda sebelum memulakan eksperimen dan air suling ditambah ke dalamnya sekiranya aras jus menurun supaya isipadu jus limau kasturi ditetapkan.

    Apabila jus limau kasturi didedahkan kepada udara dengan lama, pereputan akibat tindakan bakteria yang mungkin berlaku dan seterusnya mengakibatkan jus itu rosak. Jadi, semua jus itu terpaksa disejukkan dalam peti sejuk selepas terdedah kepada udara.

    Selain itu, kepekatan vitamin C dalam buah limau kasturi yang berbeza adalah berlainan juga. Sesetengah buah limau kasturi mungkin mempunyai kepekatan vitamin C yang lebih tinggi , manakala sesetengah daripadanya mungkin mengandungi kepekatan vitamin C yang lebih rendah akibat kematangan yang tidak seimbang dan daripada pokok yang berlainan. Ini akan mengganggu keputusan eksperimen ini.