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HCG Prueba de Embarazo
Es un inmunoensayo basado en complejos de anticuerpos de oro Coloidal designado
para la determinación cualitativamente de la Gonadotropina corionica humana
(HCG) en Suero u Orina. Esta prueba es para uso profesional y se usa para obtener
un resultado visual cualitativo en la detección temprana del embarazo.
INTRODUCCIÓN
La Gonadotropina corionica humana (HCG) es una hormona glicoproteína
segregada por la placenta desarrollándose inmediatamente después
de la fertilización. En los embarazos normales, HCG puede ser detectada
en el suero a los 7 días de la concepción, doblándose cada
1.3 a 2 días. Alcanzando 100mIU/ml en la primera falta del período
menstrual. La aparición de HCG tan pronto después de la
concepción y sus subsecuentes aumentos de concentración durante
la gestación temprana hacen de este un excelente indicador para la
detección del embarazo.
El combo de un solo paso, Orina – Suero es cualitativo. Es un inmunoensayo
conjugado, tipo sándwich, coloreado, para la determinación de HCG
en Orina. El método emplea una combinación de anticuerpos
monoclonales y policlonales para la identificación selectiva de HCG en
las muestras con un alto grado de sensibilidad. En menos de 5 minutos los
niveles de HCG iguales ó mayores a 25mIU/ml pueden ser detectados.
PRINCIPIO
Como una prueba en Suero u Orina, se difunde por la absorción de la
reacción de la reacción, en el pack, y los anticuerpos etiquetados
coloreados se enlazan al HCG de la muestra formando un complejo anticuerpo
antígeno. Este complejo se enlaza al anticuerpo anti HCG en la zona
de reacción positiva y produce una banda de color rosado cuando la
concentración de HCG es igual o mayor que 25mIU/ml. En ausencia de
HCG, no hay línea en la zona de reacción positiva. La mezcla
de reacción continúa a través del dispositivo absorbente
pasando de la zona positiva a la zona de reacción negativa, produciendo
una banda de color rosado, demostrando que los reactivos y la reacción
del pack están funcionando correctamente.
REACTIVOS
El combo de un solo paso Orina - Suero para prueba de embarazo contiene un
anticuerpo de cabra policlonal de membrana cubierta y una almohadilla conteniendo
un anticuerpo de ratón monoclonal IgG enlazado al conjugado en una
matriz proteica con 0.1% de sodio azide.
MATERIALES PROVISTOS
El paquete de reacción y un gotero plástico desechable: Cada kit
contiene cerca de 25, 50 o 100 bolsas selladas (de acuerdo a la presentación).
Cada bolsa contiene un “Paquete de Reacción” y un gotero
plástico desechable. Los paquetes de reacción contienen un
anticuerpo policlonal anti HCG de membrana cubierta y una almohadilla que
contiene un anticuerpo monoclonal (anti – HCG) enlazado a los conjugados
en una matriz proteica con 0.1% de sodio azide.
ALMACENAJE Y ESTABILIDAD
El paquete debe ser guardado a temperatura no mayor de 25 ºC o refrigerados
(2-8 ºC). Evite congelar.
PRECAUCIONES
Para uso en diagnósticos In Vitro.
Alerta: los reactivos de este kit contienen azide de sodio que puede combinarse
con el cobre y el plomo y llegan a formar en la tubería un metal altamente
explosivo. Deseche el reactivo sobrante dejando correr agua en forma abundante
para prevenir la acumulación del azide. Las muestras de Orina deben ser
consideradas peligrosas y manejadas apropiadamente
TOMA DE LA MUESTRA
Orina (0.5ml): La muestra de Orina debe ser recogida en un envase seco, limpio,
de plástico o de vidrio, sin preservativos. No se requiere
centrifugación o filtración. Las muestras recogidas a cualquier
hora pueden ser usadas. No obstante, la Orina a primeras horas de la mañana
generalmente contiene una alta concentración de hormona.
Suero (0.5ml): Recolecte la sangre asépticamente unida por venopunción
dentro de un tubo limpio sin anticoagulantes. Permita ala sangre formar un
coágulo por 20 a 30 minutos a temperatura ambiente. Centrifugue para
obtener un suero claro y transfiera el suero dentro de un tubo limpio de
plástico o de vidrio. Las muestras de suero pueden ser probadas sin
tratamiento previo.
Las muestras pueden ser refrigeradas 2-8 ºC y almacenadas hasta 72 horas
antes de los ensayos. Si las muestras son refrigeradas, ellas deben ser equilibras
a temperatura ambiente por espacio de 10 minutos antes de comenzar las pruebas.
Si la Orina exhibe una visible precipitación debe ser filtrada, centrifugada,
o permita que se asiente y que él líquido parezca lo más
limpio posible de la prueba.
PROCEDIMIENTO
Remueva el “Paquete de Reacción” de su envoltorio.
Llene el gotero de Orina y manténgalo verticalmente y dispense las gotas
en el sitio correspondiente a la muestra (ver fig. Nº1). Añada
exactamente 5 gotas (sin burbujas) de orina o gotas de Suero en el orificio
marcado con la letra “A”
Lea los resultados después de - 5 - minutos.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
En 5 minutos, una banda de color aparecerá en la región “C”
de la ventana indicando que la prueba está completa.
La ventana muestra los resultados de la prueba. Si una banda de color aparece entre
las regiones “B” y “C” el resultado es positivo. (ver fig. 2)
Si solo hay una banda en la región “C” y no en la región
“B” el resultado es negativo. (ver fig.. 1)
NOTA DEL PROCEDIMIENTO
Si la muestra no es observada a través de la ventana, se debe a que hay
insuficiente cantidad de muestra de Orina dispensada en el pozo. El usuario de
la prueba deberá releer las instrucciones antes de ejecutar nuevamente
la prueba.
CONTROL DE CALIDAD
Cada reacción tiene su propio indicador de control de calidad.
Después de ejecutada la prueba y no aparece ninguna línea en el
sector “B” y “C”, Usted posiblemente añadió
la Orina en la ventana equivocada o el dispositivo esta deteriorado. Repita el
ensayo usando un nuevo kit.
Se recomienda la utilización de controles comerciales con cada nuevo
lote de prueba para el control de calidad.
VALORES ESPERADOS (RANGO DE REFERENCIA)
Los hombres y las mujeres no embarazadas saludables no tienen HCG detectables.
En aproximadamente 7 días después de la concepción, la
concentración de HCG irá de 5 a 50mIU/ml en Suero Y Orina.
Estos niveles alcanzarán 100mIU/ml entre 60 a 80 días y continuaran
en un gradual ascenso de acerca 20.000mIU/ml después de 120 días.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Proteinuria, Hematuria, gruesa contaminación bacteriana y detergentes
pueden causar un incremento en HCG en la Orina.
Falsos positivos: Los pacientes con enfermedades trofoblásticas,
manchas hidatidiformes, o coriocarcinoma pueden producir resultados falsos
positivos. Los pacientes con teratomas ováricos y testiculares pueden
reportar también una gran cantidad de HCG.
Falso negativo: Orina diluida ó de baja densidad específica y
condiciones en la cual pueden causar desnaturalización de HCG (Ej.
Temperatura pH, contaminación con metales pesados, etc.). Pueden producir
resultados falsos negativos.
Muestras con concentraciones menores de 25mIU/ml de HCG, se detectarán
como negativas.
CARACTERÍSTICAS DE EJECUCIÓN
Sensibilidad: esta prueba detecta concentraciones iguales o mayores que 25mIU/ml
tal como es indicada por el desarrollo de una Línea en la región
“B” de la ventana. La Orina de hombres y mujeres no embarazadas
saludables normalmente mostrarán niveles no detectables de HCG cuando
son probados por el combo de un solo paso Orina – Suero prueba de embarazo.
La prueba producirá un resultado positivo en el primer día de falta
menstrual.
Especificidad: es determinada por unos estudios de reacción cruzada con
cantidades conocidas de Hormona Luteinizante (hLH), Hormona Folículo
Estimulante (hFSH), y Hormona Tiroidea Estimulante (hTSH), 500mIU/ml hLH,
1000mIU/ml hFSH, y 1000mIU/ml hTSH, todos dieron resultados negativos.
Orina menopáusica: un estudio fue realizado usando Orina de 20 mujeres
postmenopáusicas. Estas muestras fueron escogidas porque la Orina de
las mujeres postmesnopáusicas frecuentemente interfieren con las pruebas
de embarazo debido a una reacción cruzada con otras hormonas gonadotropicas.
Todas las 20 muestras de Orina fueron negativas cuando se probaron con el combo
de un solo paso Orina – Suero prueba de embarazo.
Potencialmente sustancias que interfieran fueron añadidas a la Orina
con niveles de HCG de 0-25mIU/ml. En cada caso, no hubo interferencia en los
resultados observados con el combo de un solo paso Orina – Suero prueba
de embarazo.
Orina: un estudio fue ejecutado en un total de 70 muestras de Orina positivas
y negativas. Estas fueron ensayadas con el combo de un solo paso Orina –
Suero prueba de embarazo y con una marca comercial similar y ambos test dieron
idénticos resultados en las 70 muestras. En 61 pruebas adicionales que
fueron ensayados por otro laboratorio ellos produjeron resultados idénticos.
Suero: un estudio se realizó con 165 muestras de Suero. Todos fueron
ensayados con el combo de un solo paso Orina – Suero prueba de embarazo
y con una marca comercial similar, todas las muestras dieron idénticos
resultados.
Interferencias: las siguientes sustancias fueron añadidas en cantidades
de 25mIU/ml y libres de HCG, mezclados en la Orina. Ninguna de esas sustancias
en esas concentraciones interfirieron en los ensayos.
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Acetaminofen
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20 mg/dl Cafeina
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20 mg/dl
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Ácido Acetisalicilico
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20 mg/dl Ácida Gentésico
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20 mg/dl
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Ácido Ascórbico
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20 mg/dl Glucosa
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2 g/dl
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Atropina
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20 mg/dl Hemoglobina
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1 mg/dl
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LECTURA DE LOS RESULTADOS.
NEGATIVO
Figura No. 1
Sólo una banda morada / rosada aparece en el área
“C” (control) de la tarjeta.
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REACTIVO POSITIVO) C
Figura No. 2
dos bandas morada / rosada aparecen. Una en el área
“B” y una en el área “C”
de la tarjeta.
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