Laboratorio Acerca de
los Componentes Químicos de la Materia Viva
(II Parte: Pruebas
Químicas)
I. Pruebas
relacionadas con carbohidratos:
A. Prueba para Reconocimiento de Almidón Mediante el Lugol
(prueba positiva se reconoce por coloración azul índigo).
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Tome 3 tubos de ensayo: en el tubo #1 coloque 1ml de
solución de glucosa; en #2, 1ml de solución de goma arábiga (o en su lugar, agar agar); y en el #3, 1 ml de
solución de almidón.
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Añadir al contenido de cada tubo 1 gota de lugol y mezclar
bien.
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Observe si aparece el característico color azul índigo (azul
oscuro), compare los tubos y anote sus resultados.
B. Prueba para reconocimiento de Azúcares Reductores
mediante Reactivo de Benedict* (la prueba positiva se reconoce por la formación
de un precipitado de color verde, amarillo o naranja - rojizo).
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Tome 4 tubos de ensayo: en el #1 colocar 1ml de solución de
glucosa, en el #2 colocar 1ml de solución de maltosa (o en su lugar, lactosa),
en el #3 colocar 1ml de solución de sacarosa, en el #4 colocar 1ml de solución
de almidón.
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Añada al contenido de cada tubo 5 gotas de reactivo de
Benedict* y colóquelos en un baño de agua hirviente por sólo 30 segundos;
luego, deje refrescar los tubos en una gradilla.
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Observe si se forma el precipitado característico después
del calentamiento; anote en que tipo de carbohidratos se forma este precipitado
(monosacáridos, disacáridos y polisacáridos).
*Con el propósito de economizar reactivos,
en esta experiencia usaremos 5 gotas de Benedict por cada mililitro de
sustancia; sin embargo, la forma correcta es que por cada mL de sustancia que
se va a examinar se añade 1 mL de Benedict y luego se calienta.
II. Pruebas relacionadas con Lípidos:
A. Prueba con el Sudán IV (El Sudán IV es un colorante que
solo se disuelve en grasas).
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Tome un tubo de ensayo y añada 1 ml de agua. Agréguele un
poquito de Sudán IV (se agrega sólo una cantidad como la que se puede servir en
la punta de un palillo de dientes). Mezcle bien y observe lo que sucede.
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Al mismo tubo de ensayo agréguele aproximadamente 1 ml de
aceite de cocinar. Mezcle bien y observe lo que sucede.
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Escriba sus conclusiones.
B. Prueba de solubilidad de lípidos.
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Tome 5 tubos de ensayo (en todos los tubos
debe haber aproximadamente 1 ml de aceite): al #1 añada 1 ml de agua; al #2
añada 1ml solución de detergente; al #3 1 ml de NaOH 10%; al #4 1 ml de etanol
(alcohol polar); al #5 1 ml de butanol (alcohol no polar).
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Mezcle bien todos los tubos y observe en donde se disuelve
el aceite (debe tener claro el concepto de disolución).
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Investigue: saponificación, emulsión, solubilidad y
solvente.
III. Pruebas relacionadas con proteínas:
A. Prueba de Biuret (prueba positiva se reconoce por
formación de un complejo de color violeta).
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Tome 2 tubos de ensayo: en uno coloque 1ml de solución de
gelatina, en el otro 1ml de solución de albúmina de clara de huevo.
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Añada al contenido de cada tubo 2 gotas de CuSO4
(al 2%) y 10 gotas de NaOH (al 10%).
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Mezclar bien y observar si ocurre formación de algún
complejo coloreado.
B. Prueba con el Reactivo de Millón (prueba positiva
se reconoce por la aparición de un precipitado de color rosa - violáceo).
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Tome 2 tubos de ensayo: en uno coloque 1ml de solución de
gelatina, en el otro 1ml de solución de albúmina de clara de huevo.
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Añada al contenido de cada tubo 0.5ml de reactivo de Millón
y caliente en baño María por 5 minutos (tenga cuidado con el reactivo de
Millón: es tóxico e irritante de la piel).
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Observe cuál de las dos proteínas produce una reacción
positiva.
C. Efecto de Agentes no Fisiológicos sobre las
Proteínas (los agentes no fisiológicos producen desnaturalización de las
proteínas; la desnaturalización se manifiesta como una coagulación de la
proteína o por pérdida de la apariencia turbia típica, haciéndose
transparente).
1. Efecto de
las altas temperaturas:
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Tome 3 tubos de ensayo, cada uno con 1ml de albúmina. El
primero se deja en un baño de agua a temperatura ambiente (control); el
segundo, en un baño de agua fría (entre 20-28º C); el tercero, en un baño de
agua hirviente. Todos los tubos permanecerán en la condición ya señalada por 5
minutos.
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Observe si algún tubo presenta alguna señal de
desnaturalización.
2. Efecto de ácidos y bases
fuertes:
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Tome 2 tubos de ensayo, cada uno con 1ml de albúmina.
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Al primer tubo se le añade, gota a gota, HCl diluido (1:1)
hasta que se aprecie alguna señal de desnaturalización.
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Al segundo tubo añadir, gota a gota, NaOH 10% hasta que se
aprecie alguna señal de desnaturalización.
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Compare los resultados obtenidos en ambos casos.
3. Efecto de sales de metales
pesados:
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Tome 1 tubo de ensayo y agregar 1ml de albúmina.
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Añada, gota a gota, HgCl2 (1%) hasta que se
aprecie alguna señal de desnaturalización.
IV. Prueba para determinar presencia de
ADN.
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Prueba con el Reactivo de Disché (este reactivo contiene difenilamina): Este reactivo
es un Indicador de la presencia de ADN. Después de calentar 1ml de muestra con
3ml de Reactivo de Disché, en un tubo de ensayo tapado, por 40 min. y pasarlo a
un baño de agua fría, la presencia de ADN se reconoce por la formación de un
complejo coloreado azul (la presencia de ARN se reconoce por la formación de un
complejo coloreado verde).